大片段DNA克隆载体的研究进展.pdfVIP

黑 龙 江 农 业 科 学 ???????：???～ ???? ??????????????????????????????????? 大 片 段 ??? 克 隆载 体 的研 究 进 展? 于 洋 ，蒋世 翠 ，王康宇 ，薛 菲 ，张 美萍 ，王 义? ?吉林 农 业 大学 生命 科 学 学院 ，吉林 长春 ???????? 摘 要 ：??? 克 隆技 术 是 分 子 生 物 学和 基 因 工程 研 究 中非 常 重 要 的 一 项 技 术 。 自 第一 个 质 粒 载 体 ??????作? 为 第 一 个 克 隆 栽 体 以 来 ，随 着 分 子 生物 学技 术 的迅 猛 发 展 克 隆 栽体 的 整 体 结 构 、容 载 能 力和 转 化 效 率 都 有 了? 很 大 的 改 善 。 通 过 综 述 克 隆 栽 体 的发 展 概 况 ，以及 大 片段 ??? 文 库 的 构 建 和 应 用 ．对 大 片段 ??? 遗 传 转 化? 的 发 展 做 了展 望 。? 关 键 词 ：克 隆 栽体 ；?????；大 片段 ???? 中 图分类 号 ：???? 文献 标识 码 ：? 文 章编 号 ：????—?????????????????—??? ????：??．?????／?．????????—????．????．??．????? 植 物遗 传转 化 表达 载体 是近 年来 植物 转基 因? 功 ?。?。但 由于其 克隆 容量低 ，只 有 ?????左 右 ，限? 研究 过 程 中极其 重要 的一项 。随着 植 物基 因组 计? 制 了其 发展 。第 二代 的载 体 ????酵母 人工 染 色? 划 的 实 施 ，相 继 产 生 了多 个 克 隆 载 体 ，其 发 展 经? 体 ?、????细 菌人 ：?二染 色 体 ?，其特 点 是 容载 能 力? 历 可 以 大 致 分 为 三 个 阶 段 ：质 粒 、入噬 菌 体 和? 提 高 ，可达 到 ???～ ??????，稳 定性 高 、转 化 率 高 ，? ???????也 称柯 斯 质 粒 ，粘 粒 ?的第 ?阶段 ；???、? 但 ???的缺 点 是 易发 生嵌 合 和 重 组 现 象 、制 备? ???和 ??? 的第 ?阶段 ；?????和 ???的第 ?? 复 杂 、转 化效 率 较 低 。黎 伶 俐 等人 构 建 了人 基 因? 阶段 。基 因组 文库 是 分子 克 隆和基 因组 学研 究 的? 组 ???文库???，并对 一 批 克 隆进 行 鉴 定 ，其 中 阳? 技术 基础 。也被 称 为 人 工 构 建 的 基 因 “活 期 储 蓄? 性转 化子 为 ??? 。????年 关 伟 军 等人 构建 了濒? 所 ”．迄 今 为止 经 历 了 一 系列 文库 的发 展 ，目前 文? 危畜 禽 品种 ??? 文库??，保存 了 国 家 非 常 重 要? 库 的研 究 工作 已变 得 越来越 重要 。本 文 主要介 绍? 的基 因资 源 。??? 的不 足 是 它 只 有 转 化选 择 标? 大片 段 克 隆 载体 ????? 和 ??? 载 体 系 统 的 发? 记 ，不存 在 重 组选 择 标 记 ，还 需要 进 行 杂交 验 证 。? 展 及 应 用 。?