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重组人胸腺肽在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定尹凤红肖清江周卫东陈清西厦门大学生命科学学院福建厦门厦门特宝生物工程股份有限公司福建厦门摘要采用大肠杆菌作为宿主表达重组人胸腺肽融合蛋白纯化获得并对其鉴别于发酵罐进行中试发酵表达融合蛋白经诱导离心发酵液收集菌体菌体经破碎离心亲和层析捕获获得融合蛋白每升发酵液可获得约硫氧环蛋白胸腺肽融合蛋白融合蛋白经肠激酶酶切后经亲和层析反相层析体积排阻层析等纯化步骤获得高纯度通过本纯化工艺获得的原液经和的检测纯度均大于采用玫瑰花结形成率测定活性与市售化学合成胸腺肽日达仙标
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重组人胸腺肽α1在大肠杆菌中的表达纯化与鉴定
尹凤红1,2,肖清江2,周卫东2,陈清西1*
(1.厦门大学 生命科学学院,福建 厦门361102; 2.厦门特宝生物工程股份有限公司,福建 厦门361022)
摘要:采用大肠杆菌作为宿主表达重组人胸腺肽α1 (rhTα1)融合蛋白,纯化获得rhTα1并对其鉴别.于300 L发酵罐进行中试发酵表达rhTα1融合蛋白;经IPTG诱导,离心发酵液收集菌体,菌体经破碎、离心、亲和层析捕获,获得融合蛋白;每升发酵液可获得约170 mg硫氧环蛋白-胸腺肽α1融合蛋白.融合蛋白经肠激酶酶切后、经亲和层
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