妊娠中期因子在甲状腺癌中的表达的论文.docVIP

　　妊娠中期因子在甲状腺癌中的表达的论文 【摘要】 目的研究妊娠中期因子（mk）在甲状腺癌中的表达及其临床意义。方法应用rtpcr、原位杂交方法对50例人甲状腺癌组织、30例良性肿瘤组织、30例正常口腔组织进行了mkmrna表达的研究。结果rtpcr分析显示mkmrna在甲状腺癌组织表达量远高于良性肿瘤组织（plt;0.01）。本实验中缩短型mk（tmk）仅表达于癌组织。 原位杂交结果显示mk的阳性产物位于癌细胞胞浆中；甲状腺癌组织中mk的表达率明显高于良性肿瘤组织（plt;0.01）；转移组mk的表达率明显高于未转移组（plt;0.01）。分类及分期观察，mk表达量随着甲状腺癌分期级别的递增呈上升趋势。结论mkmrna在甲状腺癌组织中高表达，并与疾病的恶性度密切相关；tmk可以作为恶性肿瘤标记物；检测mk对临床疾病诊治方案的确定具有参考价值。 【关键词】 妊娠中期因子；甲状腺癌；rtpcr；原位杂交 expression and clinical significance of midkine in thyroid gland carcinoma atology，harbin medical university, harbin 150001,china ;2.the second hospital of harbin medical university corresponding author: jiao xiaohui, email: idkine mrna in thyroid gland carcinoma.methodsrtpcr and in situ hybridization techniques ployed to detect the expression of mk mrna in 50 cases of thyroid gland carcinoma samples, 30 cases of benign tissue and 30 cases of normal tissue.resultsmkmrna a but normal tissues by rtpcr, it also shok expression onstrated that tmk expression ainly laid in the cytoplasm of cancer cells, ore, a mk expression or classification and staging.conclusionmk a, and alignancy disease. our results shoination of mk could be a valuable marker for the clinical diagnostic purpose and treatment of thyroid gland carcinoma disease. key idkine; thyroid gland carcinoma; rtpcr; in situ hybridization 1资料与方法 1.1临床资料与标本80例2002~2004年来自哈尔滨医科大学附属肿瘤医院头颈外科、附属口腔医院颌面外科临床和病理学诊断明确的组织标本，包括50例甲状腺癌（35例发生淋巴结转移，30例正常口腔组织）、30例良性肿瘤组织。.男48例，女32例，年龄22~75岁，平均年龄55.75岁。所有标本均由临床医师取材保存于液氮中。 1.2主要试剂takara rna pcr kit(amv)ver.3.0、takara taqtm、trizol（大连宝生物工程有限公司），mkmrna原位杂交检测试剂盒（武汉博士德生物工程有限公司），正义引物：5′atgcagcaccgaggcttcct3′，反义引物： 5′atccaggcttggcgtctagt3′（北京赛百盛公司合成）。 1.3方法 1.3.1rtpcr取组织50mg采用trizol一步抽提法提取总rna，进行反转录，条件：42℃ 45min，99℃ 5min。pcr条件：94℃预变性3min，94℃变性30sec，57℃退火30sec，72℃延伸30sec，共30个循环，72℃延伸10min。pcr产物在含eb的1.5%琼脂糖凝胶上分离、检测。 1.3.2原位杂交3μm厚连续切片分别进行he染色和mk原位杂交。操作步骤按照试剂盒说明书进行。细胞质中出现清晰棕黄色颗粒的细胞为阳性细胞。结果以阳性细胞数所占比例表示，光境（×400）下随机选取10个视野，每个视野计数100个细胞，阳性细胞数≤5%者为阴性（）,6%~15%者为弱阳性（+），16%~50%者