血液病检测技术讲稿.doc.doc

PAGE  PAGE 174 绪论 临床血液学检验的概述 定义：临床血液学检验是采用各种实验室检查方法和技术来分析和研究血液和造血器官的病理变化，从而阐明血液系统疾病的发病机制，协助诊断、治疗观察和预后判断的一门科学。 发展：1.近代血液学 2.形态血液学 3.免疫血液学 4.分子病 随着医学科学技术的发展和各学科的相互渗透，当代的临床血液学检验已发生根本性变化。在检验科室内，它已经是一个业务内容广泛、拥有大量自动化精密仪器、由许多具备血液学基础及临床知识和娴熟技术的人员组成的临床专业科室。其业务内容已扩展到包括血细胞计数与形态学分析、红细胞病理相关分析、白细胞病理相关分析以及血栓与止血相关分析等方面。 血细胞计数及形态学 ????由于实验室检测的自动化，以往的所谓“血常规”正被检测参数更多的全血细胞计数（CBC）所取代。最新一代的血液分析仪，除了通常的CBC项目和白细胞分类计数以外，还可直接计数网织红细胞，包括网织红细胞血红蛋白含量（CHr）和表示网织红细胞成熟程度的多项指标；直接检测有核红细胞数，并可从白细胞总数中自动扣除有核红细胞，以及准确计数血小板总数和计数大型。 ????因为现代血液分析仪作为常规检测的红细胞分布宽度（RDW），比Price-Jones曲线反映红细胞大小分布更为精确和直观。如果将MCV、MCH、MCHC、RDW等5项，结合网织红细胞的多项参数综合分析，必要时再辅以血片红细胞形态学观察，有经验的血液病医师，基本上能较准确地进行各种贫血分类和鉴别诊断。此外，这类仪器在白细胞分类检测百分比时，也报告绝对数。各种白细胞所占百分比是一个相对数，其局限性显而易见。当前不少血液学专家提倡今后只检测各种白细胞的绝对数，因为那才是反映血液中某一细胞真实含量的科学指标。 ????红细胞病理相关分析 ????除了上述由血液分析仪给出的各项红细胞指标外，显微镜下的红细胞形态学观测也十分重要，但是现今一般血液检验者对此往往不够重视。Williams血液学第6版将经细胞形态分为12类17种，并介绍了每种形态与疾病的关联，可见这方面有多么丰富的内容。其他与红细胞疾病相关的检验还有：与遗传有关的溶血性贫血和高铁血红蛋白血症患者红细胞内各种酶的测定、异常血红蛋白分析和红细胞膜骨架蛋白等的检测。以往分析这些蛋白质，多采用繁琐的生物化学法，耗时、费钱、技术要求高；虽然有一部分后来有了专用的商品试剂，但也难以推广。由于这些蛋白质的基因序列绝大部分已查明，目前生化方法正逐步被已相当成熟的分子生物学方法（如PCR、核酸分子杂交，基因或蛋白质芯片技术等）所取代。 ????白细胞病理相关分析 ????当前，用自动化血液分析仪进行白细胞分类，虽然已经取得长足进步，但尚未达到完全取代手工镜下分类的程度。它还不能准确辨认各类幼稚细胞、原始细胞以及诸如中性粒细胞的“毒性”变化和“不典型淋巴细胞”等，必要时还必须在显微镜下进行识别。事实上，外周血白细胞的构成十分复杂，单用一般染色和镜检也不可能达到准确分类。 ????例如，看来似乎比较单一的外周血淋巴细胞，实际上是由T细胞、B细胞和自然杀伤（NK）细胞所构成，其中T细胞还可再分成许多亚群。这些细胞在显微镜下是无法区分的，必须用特异的抗淋巴细胞分化抗原群（CD）单克隆抗体，建立免疫方法（如流式细胞术）进行免疫表型检测。粒细胞、单核细胞甚至血小板等也是如此，这些分化抗原目前也采用CD编号。对临床有重要意义，大小接近白细胞的巨大血小板和大小类似血小板的白细胞碎片和红细胞碎片，在血液分析仪和肉眼镜下往往也不易与血小板区分，只能用免疫学方法加以鉴别。 ????血栓与止血相关分析 ????血栓与止血相关的检验，是近年来临床血液学发展最快的领域。近10年来，由于在凝血、抗凝和纤维蛋白溶解机制及其相互关系方面进行了一系列基础性研究，在止血与血栓形成理论和实践上取得了重大突破。许多新的凝血、抗凝、纤溶因子抑制物的发现及检测方法的建立、自动化仪器的普及和试剂的商品化开发，带动了血栓与止血检验技术的发展，成为临床血液学检验的新亮点。 ????目前，这一类检验的工作量很大，在发达国家估计已占血液学检验的1/3。中华医学会检验学分会与中华医学会血液分会血栓与止血专业委员会在1997年烟台会议上联合提出了与国际接轨的PT、APTT和纤维蛋白原测定标准化方案的建议；同时建议淘汰玻片法凝血时间和Duke出血时间（需要时可用模板式出血时间法测定）。 ????目前，我国一般中等以上医院，大都开展“内源”、“外源”和“共同”途径凝血因子的过筛试验（如 PT、APTT、T.T等）和常用凝血因子测定。在抗凝因子方面抗凝血酶Ⅲ，蛋白C、蛋白S测定也日益普及。在纤维蛋白（原）降解产物（FDP），D-二聚体测定已相当普及。在