阴离子交换色谱-积分脉冲安培法测定鱼粉和玉米粉水解液中氨基酸.pdfVIP

第 33 卷 分析化学（FENXI HUAXUE） 研究报告 第 4 期 2005 年 4 月 Chinese JOurnaI Of AnaIyticaI Chemistry 475 ~ 478 阴离子交换色谱-积分脉冲安培法 测定鱼粉和玉米粉水解液中氨基酸 蔡亚岐1 刘京生2 牟世芬＊1 （1 中国科学院生态环境研究中心环境化学与生态毒理学重点实验室，北京 100085 ） （2 戴安中国有限公司应用研究中心，北京 100085） 摘 要 将高效阴离子交换色谱-积分脉冲安培直接检测法应用于鱼粉和玉米粉水解液中的氨基酸的分析测 定。该方法使用 DiOnex AminOpac pA10 阴离子交换柱为分析柱，控制柱温为 35C ，以 NaOH 和 NaAc 的强碱 性溶液为淋洗液，在合适的梯度条件下，可以实现对 17 种常见氨基酸的高效分离。在强碱性条件下，获得良 好分离的各个氨基酸可在配有金工作电极的电化学检测器上以积分脉冲安培法获得高灵敏度的检测。在优 化的测定条件下，该方法对这 17 种氨基酸的检出限在 0. 21 ~ 3. 38 pmOI 之间；峰面积校正曲线的线性范围为 2 ~ 3 个数量级；5 次平行测定的峰面积的相对标准偏差 RSD 在 0. 32% ~ 4. 7% 之间。该方法应用于玉米粉和 鱼粉水解液中氨基酸含量的测定，结果良好。对玉米粉和鱼粉水解液标准加入的回收率分别在 81. 9% ~ 108. 0% 和 90. 0% ~ 108. 0% 之间。 关键词 氨基酸，高效阴离子交换色谱，积分脉冲安培检测 ! 引 言 氨基酸是具有重要生理作用的物质，其测定也一直受到化学工作者的重视［1 ~ 3］。高效阴离子交换 ［ ］ 色谱-积分脉冲安培法是近年来出现的一种测定糖和氨基酸的直接分析法 4 ~ 6 。该方法不用衍生，操作 方便；灵敏度高，对糖和氨基酸测定的检出限常常可以达到 pmOI 或 fmOI 浓度级；实验不使用有毒的化 学试剂和溶剂，有利于环境保护和操作人员的健康。目前该方法已经应用于生物样品［7，8］、环境样 品［9］、茶叶［10］、液体调味品［11，12］和土壤提取液［13］等样品的分析测定。玉米粉和鱼粉是饲料工业的重要 原料，其水解液中氨基酸的测定对其营养评价和饲料配制具有重要意义。本实验使用 DiOnex AminOpac pA10 阴离子交换柱，控制柱温为 35C ，以 NaOH 和 NaAc 的强碱性溶液为淋洗液，以梯度淋洗实现了对 17 种常见氨基酸的高效分离。获得分离的各个氨基酸可在配有金工作电极的电化学检测器上以积分 脉冲安培法获得高灵敏度的检测，并应用于玉米粉和鱼粉水解液中氨基酸含量的测定。 # 实验部分 #. ! 仪器与试剂 氨基酸的分离测定采用 DiOnex DX-600 型离子色谱仪（美国 DiOnex 公司），包括 GS50 四元梯度泵、 AS50 自动进样器、AS50 色谱柱箱以及配备有金工作电极、复合 pH-Ag-AgCI 参比电极和作为检测池体 的钛对电极的 ED50 电化学检测器；色谱数据采集和处理采用 Cham