不同倍性泥鳅鳍细胞系的建立及生物学特性分析.pdfVIP

第 ??卷 第 ?期? 水 生 生 物 学 报? ???．??，? ?．?? ?????年 ?月? ??????????????????????????? ???．．? ???????? 不 同倍性泥鳅鳍细胞 系的建立及生物学特性分析? 李? 霞?，??马? 辰? 秦艳杰? 李雅娟??吴? 迪? 白丽雯? 刘? 博?? ??．大连海洋大学，辽宁省海洋 生物资源恢复与生境修复重点实验室，大连 ??????；? ?．大连海洋大学，农业部北方海水增养殖重点实验室，大连 ???????? 摘要：采用组织块培养法启动二倍体、三倍体和四倍体泥鳅鳍组织细胞原代培养，采用胰蛋白酶消化法传代，? 目前二倍体 、三倍体和四倍体细胞已经分别传至 ??代、??代和 ??代。三种细胞均为成纤维细胞样细胞。? 鳍组织无菌处理方法是：先用质量浓度为 ??％的碘伏浸泡 ?????；后用青霉素和链霉素的混合液??????／??? 青霉素，??????／??链霉素?浸泡 ?????；原代培养和早期传代培养所用 的培养基为 ????／???，添加体积分? 数为 ??％的胎 牛血清 、?????／??人 碱性 成纤维 细胞 生长 因子??????、?????／???型胰岛 素样生 长 因子 ????—??? 以及 ?????／??硫酸软骨素。??代以后所用培养基为 ??％???—????／???。细胞培养在 ??℃、?％???培养? 箱中。在此条件下，二倍体 、三倍体和四倍体 的倍增时间分别为 ??．???、??．???和 ??．???；二倍体 、三倍体? 和四倍体的特征染色体数 目分别为 ??条 、??条和 ???条；测定的二倍体 、三倍体和四倍体细胞及核的体积? 比分别为 ?：?．??：?．??和 ?：?．??：?．??；细胞经液氮冷冻保存 ???后，解冻复苏后测定存活率分别为? ???．????????％、???．????．???％、???．????．???％。不同倍性的泥鳅细胞系的建立丰富了鱼类细胞系的种类，为? 揭示多倍体鱼类生长、遗传等机制打下基础 。? 关键 词 ：泥鳅 ；细 胞系 ；多倍体 ；生 物学特 性? 中图分 类号：????．?：????．?? 文 献标识码 ：?? 文章编 号：????．????????????—????．??? 泥鳅 ????????????????????????????隶 属 于鲤 形 目? ???株川。用于体外培养的组织主要有鳍【? 、脾?，???】、? ???????????????、鳅 科 ???????????，广泛 分布 于 中 国? 肾 【???等 ，其 中鳍 组 织细 胞 系有 白鲟??????????????? 大 陆 、朝鲜 半 岛 、 日本 列 岛 、中国 台湾等 地 ???。泥?