Ras蛋白在地塞米松体外诱导大鼠胚胎垂体生长激素细胞.PDF

窑3228窑 现代生物医学进展 ProgressinModernBiomedicineVol.14NO.17JUN.2014 doi:10.13241/ki.pmb.2014.17.007 Ras 蛋白在地塞米松体外诱导大鼠胚胎垂体生长激素细胞 分化过程中的作用 * 程 玉 1 张 宇 1 胡志强 2 李国忠 1 项 莹 3 胡恩喜 1 王 超 4 关 峰 2 陶 宇 1 郑宏山 1 (1 哈尔滨医科大学附属第一医院神经外科 黑龙江 哈尔滨 150001；2 北京世纪坛医院神经外科 北京 100038；3 哈尔滨医科大学附属 第二医院内分泌与代谢科 黑龙江 哈尔滨 150086；4 哈尔滨医科大学附属第四医院神经外科 黑龙江 哈尔滨 150001) 摘要 目的：探究 Ras 蛋白在地塞米松体外诱导大鼠胚胎垂体生长激素细胞分化过程中的作用。方法：本课题利用大鼠胚胎垂体细胞 的无血清原代细胞培养技术，在地塞米松诱导生长激素细胞分化的过程中，加入蛋白 Ras 的抑制剂 Manumycin，利用免疫荧光、 western-blot、放射免疫分析和 MTT 等技术对 Ras 蛋白在糖皮质激素体外诱导生长激素细胞分化中的作用进行研究。结果：地塞米 松能够显著提高生长激素阳性细胞百分比和生长激素的含量(P0.01)。加入不同浓度的 Manumycin 后，地塞米松诱导的生长激素阳 性细胞百分比显著降低(P0.01)，生 长激素的含量亦出现降低（P0.05）。结论：Ras 蛋白在地塞米松诱导垂体生长激素细胞分化过程 中发挥重要作用。 关键词：地塞米松；垂体；生 长激素细胞；分 化 ；Ras 蛋白 中图分类号：Q95-3，Q593.2，R132.7 文献标识码：A 文章编号：1673-6273（2014）17-3228-04 TheeffectofRasonDexamethasone-inducedRatEmbryonicPituitary SomatotrophCellDifferentiationinvitro* ThefunctionofRasistobeexploredindexamethasone-induceddifferentiationofratembryonicpituitary somatotrophcells . Thepituitarywasharvestedforfetalpituitarycellsuspension.IntheexperimentRasinhibitor Manumycinofdifferentconcentrationswereaddedtothesuspensionforpretreatmentandcellswereculturedwithamediumcontaining Dex.Andalsoimmunofluorescence,Western-blot,radioimmunoassayandMTTTechnologywereusedinthisexperiment. Dex treatmentincreasedthepercentageofGH-positivecellsandGHcontent(P0.01).AfterpretreatmentwithManumycin,thepercentageof Dex-inducedGH-positivecellsdecreasedsignificantly(P0.01),an