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- 约4.57千字
- 约 47页
- 2017-04-27 发布于四川
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人教版高考总复习生物选修1_5
考纲要求;基础知识;小思考:用猪的血液;因为猪的红细胞无细胞核,结构简单、血红蛋白含量丰富便于提取血红蛋白。
小讨论:①PCR不需要解旋酶,而生物体内DNA复制时需要解旋酶;
②PCR需要耐热的DNA聚合酶,而生物体内DNA聚合酶在高温时会变性;
③PCR一般需经三十多次循环,而生物体内DNA复制需要生物体自身的控制。;
1.实验材料
(1)动物:鸡血细;2.几种化学试剂及其作用
(1)2 mol/L的NaCl溶液:溶解DNA 析出DNA。
(2)0.015 mol/L的NaCl溶液:溶解DNA,鉴定DNA时作溶剂。
(3)0.1 g/mL的柠檬酸钠溶液:防止凝血。
(4)体积分数为95%的冷酒精溶液:提纯DNA。
(5)二苯胺试剂:鉴定DNA。;3.方法目的;
①人和哺乳动物成熟的红细胞中不含细胞核,也没有DNA,不适于作DNA提取的材料,但却是提取血红蛋白的理想材料。
②实验过程中两次用到蒸馏水,第一次目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次目的是稀释NaCl溶液。;【例1】 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验原理的叙述正确的是 ( )
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度,随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应;解析:DNA在NaCl溶液中的溶解规律如图:
DNA不溶于酒精等有机溶剂,在沸水浴条件下,DNA遇苯胺显蓝色。
答案:B;?变式1:下列叙述中错误的是( )
A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶解而不能使其析出
B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色
C.用电泳法可分离带电性质、分子大小和形状不同的蛋白质
D.用透析法可除去蛋白质样品中的小分子物质;解析:DNA在NaCl溶液中的溶解度是随着NaCl浓度的变化而变化。在0.14 mol/L NaCl溶液中DNA的溶解度最小,低于或高于0.14 mol/L,DNA的溶解度都会增大。在DNA粗提取实验中就是先把核物质溶解在2 mol/L NaCl溶液中,然后逐渐加水,稀释至0.14 mol/L时,使DNA析出。
答案:A;
1.PCR原理
PCR反应需要在一定的缓冲溶液中才能进行,需提供:DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引物,四种脱氧核苷酸,耐热的DNA聚合酶,同时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行。;2.PCR的反应过程
(1)变性:当温度上升到90℃以上时,双链DNA解旋为单链,如下图:;(2)复性:温度下降到50℃左右,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合,如下图:;(3)延伸:温度上升到72℃左右,溶液中的四种脱氧核苷酸在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链,如下图: ;3.结果
(1)PCR一般要经历三十多次循环,每次循环可以分为变性、复性、延伸三步。
(2)两个引物之间的固定长度的DNA序列呈指数扩增。;细胞内DNA复制与PCR技术的比较;【例2】 下列操作过程的叙述中错误的是( )
A.PCR实验中使用的微量离心管、枪头、缓冲液以及蒸馏水等在使用前必须进行高压蒸气灭菌
B.PCR所用的缓冲液和酶应分装成小份,并在-20℃储存
C.PCR所用的缓冲液和酶从冰箱拿出之后,迅速融化
D.在微量离心管中添加反应成分时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头都必须更换;解析:PCR所用缓冲液和酶从冰箱中取出后应放于冰块上缓慢融化,故C错。
答案:C;?变式2:一个由32P标记的DNA分子,放在未标记的环境中培养,复制5次后标记的DNA分子占DNA分子总数的 ( )
A.1/10
B.1/16
C.1/25
D.1/32;解析:一个DNA分子n次复制后产生的DNA数目为2n,而DNA复制是半保留复制,其特点是:新形成的DNA双链一条是来自亲代的DNA分子的母链,另一条是新形成的子链。这样最初由32P标记的DNA分子复制后,其标记的两条链就分别进入两个子代DNA分子中,即两个子代DNA分子被标记了。然而由于是在未标记的环境中培养,不论多少次复制,只有最初标记过的两条链存在的两个DNA分子中含32P,这样经n次复制,标记的DNA分子占2/2n,即1/2n-1,所以本题应选B。
答案:B;
1.蛋白质分离的依据
蛋白质各种特性的差异,如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等,可以用来提取和分离不同种类的蛋白质。;2.方法及原理
(1)凝胶色谱法原理;(2)电泳法原理
一些生物大分子,如多肽、核酸等都具有可解离的基团,在一定的pH下,这些基团会带
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