石杉碱甲固体脂质纳米粒包封率的测定方法研究的论文.docVIP

　　石杉碱甲固体脂质纳米粒包封率的测定方法研究的论文 作者：李园，陈桐楷，林华庆，张蜀，邓红 【摘要】 目的 建立石杉碱甲固体脂质纳米粒(hup asln)包封率的测定方法。方法 分别采用透析法、超滤法分离固体脂质纳米粒和游离药物,以高效液相色谱法测定石杉碱甲的含量。结果 超滤法能有效地将石杉碱甲固体脂质纳米粒与游离石杉碱甲分离，回收率为98.09%，测得3批样品的平均包封率为57.63%。结论 超滤法方便快捷，结果准确，适用于石杉碱甲固体脂质纳米粒的包封率测定。 【关键词】 石杉碱甲;固体脂质纳米粒;包封率;透析法;超滤法 　　abstract:objective to establish a method for the determination of the entrapment efficiency of solid lipid nanoparticles loading huperzine a (hup asln). methods the solid lipid nanoparticles and free drugs the hup asln by ultrafiltration. the average entrapment efficiency of three batches of hup asln ine the entrapment efficiency of hup asln. 　　key ent efficiency; dialysis; ultrafiltration 　　石杉碱甲(huperzine a,hup a)是从中草药蛇足石杉(千层塔)中分离出来的天然产物，是一种高效、可逆的胆碱酯酶抑制剂，能促进记忆再现和增强记忆保持。.据 文献 报道，石杉碱甲 治疗 阿尔茨海默氏病有确切的临床疗效，是目前国际上治疗老年痴呆较为理想的候选药物[1]。但石杉碱甲生物半衰期短，口服或注射后会出现不良反应而影响其疗效[2]。近年来，固体脂质纳米粒(solid lipid nanoparticles，sln)作为一种给药新载体，在不同给药途径中具有很大的开发潜力和市场前景。将hup a包封于sln内，再制成经皮给药制剂，能增加药物在局部组织的积累并起到持续释药的作用，相对减少全身吸收以避免不良反应。 　　sln的药物包封率是处方工艺筛选与质量评价的重要指标，也是其发挥疗效的关键。本文采用高压乳匀法制备了石杉碱甲固体脂质纳米粒(hup asln)，分别用透析法、超滤法测定其包封率，并分别对这两种测定方法进行比较和方法学考察，优选出准确度高的hup asln包封率测定方法。 　 　1 仪器与试药 　　ultimate 3000型液相色谱仪(美国戴安公司);ns1001l型高压均质机(意大利niro soavi spa. 公司);zetasizer 3000hs 型激光粒度仪(英国malvern公司)。 　　石杉碱甲原料药(浙江万邦药业有限公司，批号;透析袋(截留分子量8 000～13 000，上海百博有限公司);单硬脂酸甘油酯(天津市百世化工有限公司);超滤离心管(截留分子量50 000，sartorius);泊洛沙姆188(德国basf公司);油酸(天津市大茂化学试剂厂);甲醇、乙腈为色谱纯;其他试剂为分析纯。 　 　2 方法与结果 　　2.1 hup asln的制备[3,4] 　　称取1.5 g泊洛沙姆188，加适量蒸馏水超声分散至完全溶解，将其置于70 ℃恒温水浴中，作为水相;称取处方量的主药与混合脂质材料(单硬脂酸甘油酯和油酸)，主药和脂质材料比例为1∶30(质量比)，在恒温磁力搅拌器70 ℃条件下充分熔融，作为油相。在磁力搅拌下(1 000 r·min-1)，将水相滴加到油相中，保持恒温搅拌一定时间后停止加热，并继续搅拌一定时间，得初乳。将初乳在均质压力70 000～90 000 kpa下，通过高压均质机乳匀4次，即得hup asln。同法制备3批，置于4 ℃冰箱保存，备用。同法制备空白sln。 　　2.2 色谱条件 　　色谱柱：agilent c8 柱(250 mm×4.6 mm，5 μm);流动相：0.02 mol·l-1磷酸二氢钾(ph值3.90)乙腈 (体积比86∶14);进样量：20 μl;检测波长：310 nm;流速：0.8 ml·min-1。 　　2.3 专属性试验 　　精密量取空白固体脂质纳米粒及含药固体脂质纳米粒各1 ml，用体积分数80%甲醇溶液超声破乳后定容至50 ml容量瓶中，离心，取上清液过滤，按上述色谱条件分别进样，结果见图1。由图1可见，石杉碱甲峰与相邻峰分离良好，保留时间约为6.3 min，