聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞TLR3表达的调节作用的论文.docVIP

　　聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞TLR3表达的调节作用的论文 聚肌胞对人早孕绒毛外滋养细胞tlr3表达的调节作用 【关键词】 tlr3;poly(i:c);tev-1细胞株;流式细胞仪;平均荧光强度;荧光阳性细胞数;免疫细胞化学 【摘要】 目的 通过体外实验研究toll样受体3(tlr3)在人早孕绒毛外滋养细胞株tev-1的表达及聚肌胞polyi:c对tlr3 mrna和蛋白的调节作用。方法 体外培养tev-1细胞;用不同时间及浓度聚肌胞刺激tev-1细胞后rt-pcr和流式细胞仪检测其tlr3 mrna和蛋白的表达变化;免疫细胞化学sp染色法检测tlr3蛋白的定位表达。结果 (1)polyi:c 刺激可上调tev-1细胞株tlr3 mrna的表达(plt;0.01)，且与刺激时间和剂量呈正相关。(2) polyi:c 刺激可上调tev-1细胞株tlr3蛋白表达的平均荧光强度(plt;0.01);但荧光阳性细胞数刺激12h与刺激前比较差异无显著性(pgt;0.05);刺激24h、48h的荧光阳性细胞数与刺激时间和剂量呈正关(24h plt;0.05;48h plt;0.01)。(3)免疫细胞化学显示tlr3主要定位于tev-1细胞株的细胞浆。结论 tev-1细胞株tlr3的mrna及蛋白的表达与poly(i:c) 刺激时间及剂量呈正相关;tlr3主要定位于tev-1细胞株的细胞浆，而细胞核及细胞膜没有观测到明显表达。.提示人早孕绒毛外滋养细胞可能通过细胞浆的tlr3参与早孕母-胎界面的免疫反应。 【关键词】 tlr3;poly(i:c);tev-1细胞株;流式细胞仪;平均荧光强度;荧光阳性细胞数;免疫细胞化学 　[abstract] objective to investigate the regulatory effect of polyi:c on the expression of tlr3 mrna and protein in the human extravillous trophoblast cell line (tev-1)，and e.methods semi-quantitative rt-pcr analysis，floetry and immuo-cytochemistry rna and protein expression level and location in tev-i cell line.results (1)the expression of tlr3 mrna in tev-i cell line significantly increased ulation time and dose increase; pare to ulation(plt;0.01).the mean fluorescence intensity of the tlr3 protein in tev-i cell line increased ulation time and dose increase; pare to ulation(plt;0.01).(2)the number of fluorescence positive cell of the tlr3 protein stimulated 12 hour had no statistics significance(pgt;0.05); but its increased ulation time and dose increase in 24 and 48 hour intervention(24h plt;0.05 ; 48h plt;0.01).(3)the immuocytochemistry result revealed that tlr3 protein a.hoembrane and nucleus.conclusion tlr3 protein a.the increase of mrna and protein expression of tlr3 in tev-i cell line depends on the increase of the dose and time for polyi:c’s stimulation. 　　[key etry; average fluorescence intensity; the number of fluorescence positive cell 　　正常妊娠时母-胎界面存在着很强的免疫反应，其主要作用是促进胚胎植入和调节胎盘的发育，使母体对半异体来源的胎儿、胎盘产生耐受;同时，维持宿主防御反应，从而阻止病原微生物对机体组织和妊娠的破坏。母胎界面处的滋养细胞、免疫活性细胞及