胃癌中MMP9和RAB5A的表达的论文.docVIP

　　胃癌中MMP9和RAB5A的表达的论文 【关键词】 mmp 9 rab5a 胃癌 免疫组化 胃癌的发生发展是一个长时间多步骤多阶段逐步演进的过程。我们采用免疫组化法检测46例胃癌组织，癌旁及正常组织中mmp9和rab5a蛋白的表达，旨在探讨其在胃癌形成过程中的变化规律及其与临床病理特征的相互关系。 1 资料与方法 1.1 临床资料 收集河北医科大学附属第二临床医院2004年10月～2005年10月间手术切除的胃癌标本46例，其中男性35例，女性11例，在院期间年龄最大85岁，最小27岁，平均年龄56.44岁；收集外伤和良性溃疡标本12例作为对照。均经4g/l甲醛固定，石蜡包埋，4μm连续切片，he染色病理确诊，所有患者术前均未接受放、化疗。 1.2 实验方法 应用免疫组织化学sp染色法。一抗分别为小鼠抗人mmp9单克隆抗体和兔抗人rab5a单克隆抗体，购自美国santacruz公司。sp试剂盒和dab染色试剂盒均购自北京中山生物技术有限公司。sp染色主要步骤参考试剂盒说明进行，光镜下观察结果。用已知阳性切片作为阳性对照，pbs代替一抗作为阴性对照。. 1.3 结果判断 只有明显胞浆染色的细胞被判定为正常染色；如染色不连续，明显减弱或缺失，则被评定为不正常染色。染色阳性结果判断：染色定位于胞膜和（或）胞浆并行定性分析。按染色阳性细胞数分ⅳ级计分：阴性为0分（－），0%＜y≤25%为1分，25%＜y≤50%为2分，50%＜y为3分；染色强度计分（分四级）：染色无色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，棕褐色为3分；采用阳性强度积分与阳性数量积分相加，阳性强度上，阳性细胞在阳性数目上所占比例（y）：染色强度积分与阳性数量积分相加，0分为（－），2分为（+），3～4分为（++），5～6分为（+++）。本试验将（－）和（+）记为阴性结果，将（++）和(+++)记为阳性结果。 1.4 统计学方法 应用spss13.0统计学软件。χ2检验分析各研究对象间mmp9、rab5a的表达差异，p＜0.05为差异有统计学意义， mmp9和rab5a之间的相关性用spearman等级相关分析。 2 结果 2.1 mmp9在胃癌原发灶中和癌旁3.0cm组织中的表达 mmp9在胃癌原发灶中表达明显增高[1]。mmp9在癌旁3.0cm组织中的表达增高，与原发灶中的表达差异无统计学意义??见表1。mmp9在胃癌组织中的表达与年龄、性别、肿瘤大小差异无统计学意义；与组织学类型，侵及范围，淋巴结转移差异有统计学意义，见表2。表1 mmp9 和rab5a在不同部位的表达情况 组别例数mmp9rab5a阳性数阳性率%阳性数阳性率%胃癌组①463882.613678.26癌旁3.0cm②463065.222963.04正常胃粘膜③120000 mmp9：①与③比较，χ2=25.208，p=0.001; ②与③比较，χ2=16.211，p=0.001；rab5a：①与③比较，χ2=21.546，p=0.001; ②与③比较，χ2=15.130，p=0.0012.2 rab5a在胃癌原发灶和癌旁3.0cm中的表达 在胃癌原发灶中rab5a的表达明显升高。在癌旁3.0cm组织中的表达增高，二者差异无统计学意义，见表1。rab5a在胃癌中表达与年龄、性别、肿瘤大小差异无统计学意义；与组织学类型，侵及范围，淋巴结转移差异有统计学意义，这与相关研究一致[2]，见表2。 2.3 mmp9和rab5a在正常胃粘膜中的表达 mmp9在正常胃粘膜（外伤或病理证实为良性表2 mmp9 和rab5a在胃癌中的表达与其临床病理特征之间的关系 临床资料例数mmp9阳性数阴性统计量prab5a阳性数阴性数统计量p年龄≤557520940.760433270.9480.330性别男35305女11830.2870.592278920.0001.000直径≥3cm32275lt;3cm141130.0030.9562661040.1260.723组织学类型高分化826中低分化腺癌3836217.7800.0012634412.5800.001浸润范围肌层1275浆膜层343134.5700.0335731310.0350.002淋巴结转移无1486有323026.7150.0106830211.9860.001 溃疡）中表达阴性，与胃癌原发灶比较差异有统计学意义。rab5a在正常胃粘膜中表达阴性，与原发灶比较差异有统计学意义，见表1。 2.4 胃癌组织中 mmp9与rab5a表达的相关性 实验证明mmp9与rab5a在胃癌组织中的表达具有正相关性，见表3。表3 mmp9与rab5a在胃癌组织中的表达情况