脑肿瘤干细胞放射敏感性的实验研究的论文.docVIP

　　脑肿瘤干细胞放射敏感性的实验研究的论文 【摘要】 目的 评价脑肿瘤干细胞（brain tumor stem cell,btsc）与胶质瘤细胞系shg44细胞放射敏感性的差异。方法 shg44细胞分别接种于含10％胎牛血清的dmem/f12培养基和无血清的dmem／f12培养基(添加bfgf和egf)中。cd133免疫细胞化学染色鉴定btsc。0、0.5、1、2、3、4、6、8、10、20 gy x线照射shg44细胞和btsc后以流式细胞仪检测两种细胞的细胞周期及细胞凋亡率，绘制shg44细胞和btsc的存活曲线。结果 shg44细胞中存在btsc，后者能在无血清的dmem／f12培养基中存活并悬浮生长，增殖形成克隆球，具有自我更新和增殖能力，表达特异性标志物cd133。两种细胞在x线照射后细胞周期无明显差异，btsc的细胞凋亡率低于shg44细胞(plt;0.05)，细胞存活率高于shg44细胞(plt;0.01)。结论 btsc的放射敏感性较shg44细胞明显降低，是胶质瘤放疗抵抗的主要原因。 【关键词】 脑肿瘤干细胞；shg44细胞；胶质瘤；放射敏感性 experimental research of radiosensitivity for brain tumor stem cell ke jin1,he jie2（1.department of oncology,zhongda hospital,southeast university,nanjing 210009,china； 2.department of pathology,fourth people′s hospital of or stem cell(btsc) and human glioma cell line shg44 cell.methods shg44 em/f12 supplemented free dmem/f12 containing bfgf and egf respectively.btsc munocytochemistrical staining etry assay ined by the measure of cell clone formation.results shg44 cell contained btsc,eans of suspension in serumfree medium and proliferate into the clonal sphere.the clonal spheres maintained strong ability of selfrenearker cd133 could be expressed by btsc.after btsc and shg44 cell etry assay shoation in btsc ain cause of glioma radioresistence. key or stem cell；shg44 cell；glioma；radiosensitivity （modern medical journal,2009,37:192194） 脑胶质瘤(neurogliocytoma)是最常见的颅内原发性肿瘤，占中枢神经系统肿瘤的60%以上，无论放疗、化疗还是手术治疗，恶性胶质瘤患者的中位生存期只有14.6个月［1］。.放疗是脑胶质瘤最有效的治疗手段之一，但由于肿瘤的放疗抵抗性使得相当一部分患者在放疗后出现复发。最近研究发现，脑肿瘤中存在具有自我更新特性的细胞亚群即脑肿瘤干细胞(brain tumor stem cell，btsc)，是引发肿瘤并维持其生长的根源，并在肿瘤的复发过程中起着决定性作用［2］。放疗失败的原因可解释为放射线并没有将肿瘤干细胞全部杀死,存活下来的肿瘤干细胞具有无限增殖能力,能继续促进肿瘤生长。本研究旨在探讨btsc在胶质瘤放疗抵抗性中的作用及其可能的机制。 1 材料和方法 1.1 材料 胶质瘤细胞系shg44细胞（上海中国科学院），dmem／f12(1∶1)培养基(南京天为公司)，胎牛血清（杭州四季青公司），胰蛋白酶(sigma公司)，人表皮生长因子(egf，peprotech公司)，人碱性成纤维生长因子(bfgf，peprotech公司)，兔抗cd133多克隆抗体（abcam公司）。 1.2 方法 1.2.1 shg44细胞的培养和传代 shg44细胞接种于含10％胎牛血清的dmem/f12培养基中，在37 ℃、5％co2的饱和湿度培养箱中培养。5～7 d后按1∶2 或1∶3的比例传代。 1.2.2 btsc的培养和传代 shg44细胞接种于含egf（20