脂肪酶作用原理和的应用领域.pptVIP

脂肪酶的作用原理与应用领域;内容;脂肪酶（lipase）又称甘油酯水解酶，是指分解或合成高级脂肪段和丙三醇形成的甘油三酸酯酯键的酶。 ;;脂肪酶是一类特殊的酯键水解酶，只作用于异相系统，即只在油水界面上作用，而且只有在当底物以微粒，小聚合分散状态或呈乳化颗粒时，脂肪酶对底物水解才有显著的催化作用。;脂肪酶基本组成单位仅为氨基酸，通常只有一条多肽链。它的催化活性仅仅决定于它的蛋白质结构。;;脂肪酶催化的反应 ;脂肪酶的来源： 脂肪酶广泛存在于动物植物和微生物中。 植物中含脂肪酸较多的是油料作物的种子，当油料种子发芽时，脂肪酶能与其他的酶协同发挥作用催化分解油脂类物质生成糖类，提供种子生根发芽所必须的养料和能量； ;动物体内含脂肪酶较多的是高等动物的胰脏和脂肪组织，在肠液中含有少量的脂肪酶，在动物体内，各类脂肪酶控制消化，吸收，脂肪重建和蛋白质代谢等过程；;细菌，真菌和酵母中的脂肪酶含量更为丰富。由于微生物种类多，繁殖快，易发生遗传变化，具有动植物更广的作用，且微生物来源的脂肪酶一般都是分泌性的胞外酶。;适合于工业化大生产和获得高纯度样品，因此微生物脂肪酶是工业用脂肪酶的重要来源，并且在理论研究方面也具有重要的意义。;微生物脂肪酶：细菌28个属 放线菌4个属 酵母菌10个属 其他真菌23个属 一共65个属的微生物生产脂肪酶;脂肪酶的生产方法 ;脂肪酶菌株的筛选 筛选路线： 采样→富集培养→初筛→复筛→检测酶活→鉴定菌种→保藏菌种 初筛方法：可淘汰85%-90%不符合要求的微生物利用平皿的生化反应进行分离;Rhodamine B 平板筛选法 筛选原理：只放在脂肪酶的催化作用下水解生成甘油和脂肪酸，脂肪酸能与Rhodamine B 的阳离子发生作用，生成黄色的荧光物质，所以用紫外灯的观察，产脂肪酶的菌株周围会出现荧光圈，依据荧光圈的大小进行菌株的筛选。; ;溴甲酚紫平板筛选法： 筛选原理：溴甲酚紫作为一种显色剂，其PH变色为5.2-6.8，在碱性条件下显紫色，在酸??条件下鲜黄色，只放在脂肪酶的催化作用下生成的脂肪酸会使培养基的PH降低，产脂肪酶菌株的周围会出现先黄色的透明圈，根据透明圈的有无和大小来筛选产脂肪酶的菌株，透明圈越大说明产脂肪酶活力越强。;琼脂块培养法： 将分离培养基用灭菌的打孔器制作成许多单个的直径约0.6cm的小琼脂块，排放在干净的培养皿内，将套选的菌株接种在这些小琼脂块上培养，让其充分生长。;然后依次再将长满菌的小琼脂块放到酶活测定板上，28℃培养1-3d，观察各菌落周围油脂水解圈的大小，水解菌越大，酶活越强，将水解圈大的菌株纯化后保存在斜面培养基上。;;测定脂肪酶酶活常用方法的比较;脂肪酶的特性，结构和催化作用原理;脂肪酶的最适温度和最适PH 脂肪酶的最适温度一般在30-60℃之间，最适PH一般为6-10，不同来源的脂肪酶的最适合的温度和最适合的PH差异也比较大。列入一株无花果假丝酵母的脂肪酶最适温度为42℃，最适PH为8.0，一株青霉突变株的最适温度为25℃，最适PH为10;脂肪酶的界面活化机理;在底物浓度处于溶解状态下，脂肪酶几乎没有活性，只有当底物浓度逐渐增加到超出其溶解度极限时，才表现出明显增加的活性，这种现象称为“界面活性”。;脂肪酶的类型和生理分布情况 大多数脂肪酶的行动特定位置上的脂至底物（小肠）甘油骨干。列入，人体胰腺酶。只是主要的酶，能分解人体消化系统中的膳食脂肪。转换成单甘酶和两种脂肪酶的摄入由衷的甘油三脂基板。其他及中国类型那个的脂肪酶的活性存在于自然中 如磷脂和鞘磷脂，然而，这些通常是从 传统的脂肪酶 分别对待。 ;在干按预案微生物分泌的一些脂肪酶的表达。尤其是白色念珠菌永远的大量不同的脂肪，这可能反映了广泛的脂肪分解活性，这可能有助于人体组织的持久性拜念珠菌的毒理。;生理分布脂肪酶在不同的生物过程，从日常饮食甘油三酯代谢的细胞信号不等和炎症。因此，细胞内某些酶的活动只限于特定的车厢，而在细胞外空间的其他工作。例如在溶酶体酶，这种酶是局限在一个叫做溶酶体细胞器。;其他脂肪酶，胰脂肪酶，如被分泌到细胞外空间，他们为处理成更简单的形式，可以更容易吸收和运输整个身体的饮食血脂。 ;真菌和细菌分泌的脂肪酶，以促进养分的吸收，从外部介质（或病原微生物的例子，以促进一个新的主机入侵）。一定黄蜂和蜜蜂毒液含有磷脂，加强“生物损伤和炎症刺交付有效载荷”。作为生物膜是活细胞的组成部分，主要是磷脂的组成，脂肪酶在细胞生物