转座子(真核)选编.pptVIP

第二节? 细菌转座因子的转座机制、遗传效应和应用 一、转座因子的插入机制 转座因子不同于噬菌体和质粒，它们不是独立的复制子，不能独立存在。所有转座因子，包括插入序列、复合转座子、TnA及Mu噬菌体等的转座机制都很相似。 转座因子插入到一个新的部位的通常步骤是： 1.在靶DNA序列两侧各一条单链上造成一个切口，切口之间的距离决定了将来转座子两侧正向重复单位的长度。 2.转座子插入带有与突出单链末端的切口之间，二者共价连接起来， 3.由此形成的两段靶序列单链区由DNA聚合酶Ⅰ或其它类似的酶填充，再由连接酶将端口连接起来。交错末端的产生和填充解释了在插入部位产生靶DNA正向重复的原因。? ;二、转座模型 根据转座因子在转座过程中是否有共整合体及转座因子是否有复制而分为二种类型：复制型转座和非复制型转座；又可根据转座过程的不同，而分为剪-贴型转座、保守型转座和复制型转座等。 1.复制型转座(replicative transposition) (1)供体分子上的转座子首先被转座酶在其两端被交错切开，使转座子的两个DNA链都带有游离的3’末端OH基。 (2)转座酶在转座子两端进行切割的同时也对靶部位的两个链进行交错切割， (3)供体和靶链在切口处连接，转座子的每个DNA链的3’末端OH基与靶位点切割后产生的突出单链5’末端磷酸基团共价连接，从而产生一种交叉结构。 ;;2.非