人参皂苷Rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的论文.docVIP

　　人参皂苷Rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的论文 【摘要】 目的 探讨人参皂苷rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。方法 从孕16天sd大鼠胚胎脑组织中分离培养胚胎神经干细胞,免疫组化法进行神经干细胞的鉴定及增殖鉴定,采用稀释法筛选和检测人参皂苷rg1对体外培养胚胎神经干细胞增殖作用的影响。结果 剂量筛选结果显示,人参皂苷rg1组(100、4、0.8 μmol/l)神经球数明显增加。选定人参皂苷rg1 40、4、0.4 μmol/l作为高、中、低剂量进行进一步实验研究,与对照组相比,人参皂苷rg1高、中、低剂量组神经球生成数目明显增加。结论 人参皂苷rg1可以明显增加神经球生成数目,具有促进胚胎神经干细胞体外增殖的作用。 【关键词】 人参皂苷rg1;胚胎神经干细胞;增殖 　effects of ginsenoside rg1 on the proliferation of neural stem cells cultured in vitro zhou zhi-huan, , tianjin 300193, china) 　　abstract：objective to explore the effect of ginsenoside rg1 on proliferation of neural stem cells (nscs) in vitro. methods the nscs cultures the brain of embryonic day 16 sd rat. primitive nscs munocytochemical (icc) staining of nestin. the icc staining of brdu ited dilution method, the effect of ginsenoside rg1 on the proliferation of nscs ol/l) of ginsenoside rg1 could promote the proliferation of nscs in vitro. pared bers of nerurospheres of the three dosage ginsenoside rg1 groups (40, 4, 0.4 μmol/l) ote the proliferation of nscs in vitro. 　　key bryonic neural stem cells;proliferation 　　神经干细胞(neural stem cell,nscs)具有自我更新能力和多向分化潜能[1],在神经系统疾病或损伤的修复中起着重要的作用。.研究调节nscs增殖分化的影响因素,诱导其增殖和定向分化为中枢神经系统损伤修复和退行性变的治疗带来了希望。因此,nscs的体外培养、增殖、诱导定向分化的研究已成为神经科学的一个研究热点。本研究对体外培养胎鼠nscs进行增殖鉴定,观察了人参皂苷rg1对nscs增殖能力的影响,为开发对nscs具有保护效能的治疗药物、探索神经系统疾病新的治疗方法打下基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 培养基、试剂及药物 　　dmem/f12(1∶1)培养基(lot.no atb31223,hyclone,u.s.a);hbss液(无钙离子和镁离子,lot.nolonza,u.s.a);b27添加物(lot.no 311624,gibco/invitrogen);青霉素-链霉???溶液(双抗,100×)(每毫升含有10 000 u青霉素以及10 mg链霉素,cat.no p4333,sigma);重组人碱性成纤维细胞生长因子(bfgf,cat.no cyt-218,prospec-tany,israel);人表皮生长因子(egf)(lot.no 3860501000,strathmann biotec,germany);人参皂苷rg1、丹酚酸b(天津中一制药)。 　　1.2 大鼠胎鼠神经干细胞原代培养及传代 　　取孕龄16天孕鼠,脱臼处死,75%乙醇浸泡消毒3～5 min,无菌条件下打开腹腔,取出串珠状子宫,浸泡于冷hbss液中。取出胎鼠,置于另一含有冷hbss液的培养皿内,小心剥离外层骨膜,取出大脑皮质并去除软脑膜,冷hbss液漂洗2次后,转移至离心管。加入一定量冷hbss液后吹打至肉眼看不到明显组织块,使液体呈均匀悬浊状。过200目(70 μm)筛网,1 000 r/min离心8 min,弃上清,全培基(含2%b27、20 μg/l bfgf、20 μg/legf的dmem/f12,1%双抗)重悬,约3～4个胎鼠/75 cm2的密度种入培养瓶中,37 ℃、5%co2培养箱