冬两季黑鲷消化酶活力的比较及反应温度和pH对酶活力的影响.PDF

第 28 卷 第 4 期 海 洋 学 报 Vol. 28, No . 4 2006 年 7 月 ACTA OCEANOLOGICA SINICA July 2006 夏、冬两季黑鲷消化酶活力的比较及反应温度和 pH对酶活力的影响 梅景良1 ,马燕梅1 ,张红星1 ,王寿昆1 ,林树根1 ( 1 福建农林大学 动物科学学院, 福建 福州 350002) 收稿日期: 2005-05-17; 修订日期: 2005- 10-08. 基金项目: 福建省教育厅项目资助( K02050) 作者简介: 梅景良( 1967 ) ,男,福建省惠安市人,副教授,硕士,从事兽医药理学教学与水产动物疾病防治研究. E-mail: fujianm jl@ 126. com 关键词: 黑鲷;消化酶; 夏季;冬季;反应温度; pH 中图分类号: S965 231 文献标识码: A 文章编号: 0253-4193( 2006) 04-0167-05 1 引言 消化酶活力是反映鱼类消化生理机能的一项重 要指标,鱼类消化酶活力的高低决定鱼类对营养物 质消化吸收的能力, 从而决定鱼类生长发育的速度, 因此近年来对鱼类消化酶活力的研究也越来越受到 重视.但有关鱼类消化酶的研究在淡水鱼中报道较 多,海水鱼的报道较少 [ 1~ 9 ] . 黑鲷 Sparus macro- cep halus , 隶属于鲈形目 Perciformes、鲷科 Spar-i dae、鲷属 Sp ar us, 其肉嫩味美, 营养丰富,市场需求 大,是我国近海重要的海产经济鱼类,近年来养殖规 模不断扩大.在人工饲养过程中, 由于季节、水温和 pH 不同,黑鲷的生长、发育、成活率都有差异 [ 10] . 因 此,我们从黑鲷消化酶活力分析入手, 研究了夏、冬 两季黑鲷胃、肠及肝胰脏中蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶 等 3种主要消化酶的活力以及反应温度、pH 对这 些酶活力的影响,以期了解黑鲷冬、夏两季的消化生 理特点并探讨其变化规律,为黑鲷冬、夏两季饵料的 配制及添加剂的应用提供科学依据. 2 材料与方法 2 1 样品的制备 本试验用黑鲷均购自福州一养殖场,采用鲜活 饲料(主要是本地张网捕获的小杂鱼)饲养. 夏冬两 季的实验鱼个体大小接近, 体重范围为 298 3 ~ 350 9 g ,体长范围 26 8~ 27 9 cm.饥饿 72 h后, 在 冰盘中解剖活鱼, 取出胃、肠和肝胰脏, 剥除脂肪和 结缔组织, 然后剪开胃、肠道及肝胰脏, 并用精密 pH 试纸测其 pH 值.再用 4 的蒸馏水冲净消化道 内容物,用滤纸轻轻揩干净, 分别称重后剪碎;用其 重量 10倍(胃 20 倍)的体积的 4 蒸馏水进行匀 浆,匀浆液在 4 离心 30 min( 10 000 r/ min) , 将上 清液即粗酶提取液置 4 冰箱中保存备用( 24 h内 分析完毕) . 每组实验用鱼为 9尾, 设重复组,取平均值进行 分析.夏季试验于 2003年 7月上旬进行,气温为 27 ~ 34 ,养殖池水温为 28~ 30 ;冬季试验于 2003 年 12月下旬进行,气温为 14~ 18 ,养殖池水温 1 为 5~ 16 . 2 2 蛋白酶活力测定 参照 Fo lin-酚法[ 1 1]进行. 定义 1 g 新鲜组织每 分钟水解酪蛋白产生 1 g 酪氨酸为 1个蛋白酶活 力单位. 2 3 淀粉酶活力测定 参照 3, 5-二硝基水杨酸法[ 2] 进行. 定义在 pH 为 7 5 时, 1 g 新鲜组织每分钟可溶解淀粉产生 1 mo l麦芽糖为 1个淀粉酶的活力单位. 2 4 脂肪酶活力测定 参照聚乙烯醇橄榄油乳化液水解法 [ 12] 进行.定 义在 pH 为 7 5时, 1 g 新鲜组织每分钟催化聚乙烯 醇橄榄油乳化液产生 1 mol脂肪酸为一个脂肪酶 活力单位. 2 5 反应温度对消化酶活力的影响 蛋白酶和淀粉酶活力测定的温度设置在 25~ 55和 20~ 50 , 以 5 为一个梯度, 共设 7 个梯 度;脂肪酶活力测定温度在 15~ 40 内,以 5 为 一个梯度,设置了 6个梯度,分别在各温度下测酶活 力.反应温度由恒温水浴锅控制. 2 6 pH值系统设计 采用 0 025 mol/ dm3 磷酸氢二钠缓冲液, 胃消 化酶测定在 pH 值为 2 0~ 9 0,以 pH 值 1 0 为一 个梯度,共设 8个梯度; 肠和肝胰脏消化酶测定在 pH 值为 5 0~ 8 0, 以 pH 值 0 5为一个梯度, 共设 7个梯度. 分别在各 pH 值下测酶活力, 反应温度为 37 . 3 结果与分析 3 1 夏、冬两季黑鲷胃肠道及肝胰脏中消化酶活力的比较 3 1 1 蛋白酶活力大小的比较 夏季黑鲷蛋白酶活力远高于冬季(图 1) . 夏季 黑鲷胃、