双氟胞苷对兔晶状体上皮细胞体外生长的抑制作用的论文.docVIP

　　双氟胞苷对兔晶状体上皮细胞体外生长的抑制作用的论文 双氟胞苷对兔晶状体上皮细胞体外生长的抑制作用 【关键词】 双氟胞苷;晶体;上皮细胞;细胞培养技术;兔 【摘要】 目的探讨双氟胞苷对培养的兔晶状体上皮细胞(rlecs)体外生长的抑制作用，为临床防治后发性白内障提供理论依据。方法在第3代体外培养rlecs中加入不同浓度双氟胞苷，采用mtt比色法及血细胞板计数法观察不同浓度的双氟胞苷对体外培养的rlecs增殖的抑制作用。结果浓度为64 mg/l双氟胞苷在24 h对rlecs无明显的抑制作用;浓度为128~4 096 mg/l的双氟胞苷在24、48、72 h对rlecs有明显的抑制作用，与阴性对照组比较差异有统计学意义(f=22.248~34.090，q=2.188~11.353，plt;0.05)。在同一作用时间随双氟胞苷浓度的增高，对rlecs的抑制作用逐渐增强，各浓度之间比较差异具有统计学意义(q=2.122~10.524，plt;0.05)。各实验浓度的双氟胞苷对rlecs的抑制作用随作用时间延长逐渐增强，在72 h抑制作用最强。mtt比色法结果与血细胞板计数法结果一致。结论双氟胞苷可抑制体外培养rlecs的增殖，可用于抑制、预防后发性白内障的形成。 【关键词】 双氟胞苷;晶体;上皮细胞;细胞培养技术;兔 　[abstract]objectiveto study the depressant effect of gemcitabine on the cells of rabbit epithelium lentis (rel) in vitro, and provide a theoretical evidence for treatment of aftercataract.methodsthe cells of rel citabine citabine at different concentrations on the cells easured tt staining colorimetry and cell count technique.resultsthe gemcitabine at the concentration of 64 mg/l for 24 h did not shog/l for 24 h, 48 h, and72 h shoe-time condition, the inhibitory action increased ci-tabine, the differences among different concentrations e concentration, the effect of prohibition depended on time. the result of mtt citabine depresses the grocitabine; lens, crystalline; epithelial cell; cell culture technique; rabbits 　　后发性白内障是白内障囊外摘除术后常见的并发症,也是影响病人术后视力的最主要原因之一，其术后1、3、5年的白内障发生率在成人可以高达11.8%、20.7%、28.5%[1-2]。.有关实验的结果表明，术后残留的晶状体上皮细胞的增殖和迁移，转化为成纤维细胞，可能是形成后发性白内障的主要原因之一[3-4]。本实验旨在观察双氟胞苷对培养的兔晶状体上皮细胞(rlecs)体外生长的抑制作用，为临床防治后发性白内障提供理论依据。 　　1材料和方法 　　1.1材料 　　1.1.1实验动物取实验用家兔10只，体质量为1.5～2.5 kg，雌雄不限，由青岛大学医学院动物实验中心提供。 　　1.1.2主要试剂与药品dmem干粉培养基(gibco brl 公司)，小牛血清(杭州四季青生物工程材料研究所)，胰蛋白酶(gibco brl 公司)，四甲基偶氮唑盐(mtt，sigma 公司)，双氟胞苷(美国礼莱亚洲公司)，青霉素钠(华北制药有限公司)，硫酸链霉素和硫酸庆大霉素(山东鲁抗医药股份有限公司)。 　　1.2方法 　　1.2.1培养液的配制将dmem干粉培养基加入1 000 ml三蒸水配制成dmem培养液，加入灭活的小牛血清,使之成为含体积分数0.150小牛血清的培养液，4 ℃冰箱保存。mtt溶液: 将mtt474用pbs液溶解，浓度为5 mg/l,两层微孔滤膜过滤除菌，4 ℃避光保存。 　　1.2.2rlecs的培养实验用兔空气栓塞致死后，完整摘除眼球，在超净工作台内取出晶状体，分离出连着晶状体赤道部的前囊膜。将晶状体前囊膜剪成组织碎片，均匀铺贴于培养瓶底壁，加入培养液置于培养箱中，至细胞游出相互融合，然后进