塞来昔布对鼻咽癌CNE2细胞增殖抑制的实验研究的论文.docVIP

　　塞来昔布对鼻咽癌CNE2细胞增殖抑制的实验研究的论文 【摘要】 目的研究环氧化酶2抑制剂塞来昔布对鼻咽癌细胞e2增殖的影响。方法采用mtt法测定细胞代谢率，以流式细胞术观察细胞dna含量和凋亡的变化情况，免疫组化sp法检测cox2的表达情况。结果塞来昔布对e2细胞有明显的增殖抑制作用，呈时间和剂量依赖性。细胞周期各时相dna 含量改变明显，g0～g1期细胞显著升高 (由最初47.03%升至最高79.20%)，而s、g2～m期细胞明显下降；凋亡率显著增高。塞来昔布明显下调细胞中cox2蛋白的表达。结论塞来昔布对鼻咽癌e2 细胞有明显的增殖抑制作用，并且呈时间和剂量依赖性，使细胞聚集在g0/g1期,其机制涉及cox2依赖性途径。 【关键词】 塞来昔布；cox2；细胞增殖；鼻咽癌 groa cell line e2 by celecoxib yi fang1，2, xu xinhua1，2,fu xiangyang1，2,dai delan1，2,li daojun1，2,zhang changju3 1.department of oncology,central hospital of yichang city,the first clinical medical college of three gorges university,yichang 443003,china;2.oncology research institute of three gorges university,3.medical collegeabstract：objective to investigate the groa cell line e2 treated ethodsthe cell survival rate easured by mtt assay, the cell cycle and apoptosis etric method (fcm), the expression of cox2 protein in e cells treated ethod.resultscelecoxib remarkably inhibited the groor cells, onstrated in a time and dose dependent effect. the dna content in each phase of cell cycle has significantly changed as follobers in g0~g1 fraction increased significantly (from 47.03% up to the highest percentage of 79.20%), phase of cell cycle. apparently apoptosis the result of immunochemistry sp method it suggested that celecoxib dramatically suppressed the expression of cox2 in e2 cells.conclusioncelecoxib effectively inhibited the groor cells ulation of tumor cells in g0/g1 phase. importantly, the mechanism of antitumor effect by celecoxib may include cox2 dependent a 1材料与方法 1.1主要试剂塞来昔布购于安徽合肥森瑞化工有限公司，rpmi1640 培养基为美国gibco公司产品，小牛血清为杭州四季青产品，噻唑蓝(mtt)为美国sigma公司进口分装，碘化丙啶(pi)购于sigma公司，鼠抗人cox2单克隆抗体为美国santa cruz产品，sp超敏试剂盒和dab显色试剂盒均为北京中杉金桥生物技术有限公司产品。. 1.2细胞培养人鼻咽癌细胞株e2 从中南大学湘雅医学院肿瘤研究所引进，培养在rpmi1640＋10%小牛血清＋双抗(青霉素100u/ml、链霉素100μg/ml)、37℃、5 %co2中，每隔1～2d传代一次。 1.3mtt 法检测塞来昔布对e2细胞增殖活性的影响塞来昔布用95%的乙醇溶解，配成40mmol/l 的储存液备用。取指数生长期细胞用0.25%胰酶消化，稀释成1×105/ml，每孔200μl 接种于96 孔板并与下列浓度的药物共同培育：50、100、150μmol/l，对照组为含1ml/l乙醇的培养液。分