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多指标自身抗体联合检测与乙型肝炎DNA关系的论文.doc
多指标自身抗体联合检测与乙型肝炎DNA关系的论文
【摘要】 目的:探讨自身抗体与乙型肝炎病毒感染的关系。方法:用酶免疫斑点法测定乙型肝炎患者抗心磷脂抗体(aca)、抗平滑肌抗体(asma)、抗核抗体(ana)。结果:45例乙型肝炎患者中aca 、asma、ana检出阳性率显著高于健康对照组(plt;0.05)。实验组自身抗体的产生与hbvdna实时荧光定量pcr结果成对应关系的aca有8例,阳性率为17.78%;amsa 7例,阳性率为15.56%;ana 10例,阳性率为22.23%;与肝酶谱alt、ast、ggt的关系表现为aca 10例,阳性率为22.23%;amsa 3例,阳性率为6.67%;ana 12例,阳性率为26.67%;hbvdna实时荧光定量pcr对数值梯度与肝酶谱的释放成正比。结论:aca、asma和ana的产生与是否感染乙型肝炎无关,但与乙型肝炎病毒是否活跃和肝功能的损伤程度有关。
【关键词】 肝炎;hbvdna;自身抗体
我国是乙型肝炎的高发区[1],严重威胁着人们的身体健康。在乙型肝炎患者中,由于致病因素复杂,产生不同的临床病理变化。有资料显示乙型肝炎不会直接导致肝细胞的损伤,其病情加重是由于机体的免疫应答所致[2];为探讨自身抗体的产生与实时荧光定量pcr hbvdna对数值关系和意义,2009年2-5月将我院45例hbvdna实时荧光pcr定量gt;1×103血清标本进行了多指标自身抗体检测,分析如下:
1 对象与方法
1.1 标本来源
实验组标本选自2009年2月至5月在我院门诊和住院的乙型肝炎患者45例,其血清均经实时荧光pcr定量(copy/min)检测gt;1×103,其中(4.38±3.34)×103 22例,男性13例,女性9例,平均年龄37.5±14.33岁;(3.62±2.33)×1047例,男性3例,女性4例,平均年龄32.11±18.24岁;(5.23±1.86)×105 9例,男性8例,女性1例,平均年龄47.37±11.41岁;(7.33±2.48)×106 3例男性1例,女性2例,平均年龄38.9±23.4岁;(3.24±2.35)×1074例,均为男性,平均年龄28.36±11.43;对照组为在我院进行健康体检者20例,其中肝功正常,hbvdna实时荧光pcr定量lt;1×103,男性10例,女性10例,平均年龄32±10.2岁。.
1.2 方法
1.2.1 多指标自身抗体检测 抗心磷脂抗体(aca),抗平滑肌抗体(asma),抗核抗体(ana),试剂德国欧蒙公司生产,酶免疫斑点试剂盒,严格按说明书操作。
1.2.2 肝酶谱分析丙氨酸氨基转移酶(alt),天冬氨酸氨基转移酶(ast),r谷氨酰氨转肽酶(ggt)。
1.2.3 hbvdna实时荧光pcr定量检测 采用roch lightcycler实时荧光定量pcr进行hbvdna检测,试剂盒为广州中山大学达安基因公司生产。
1.3 统计学分析
数据均采用spss10.0软件包分析,各组间阳性率比较采用x2检验,以plt;0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 45例乙型肝炎患者中aca、asma、ana阳性率随hbvdna定量对数值强度增加而升高,实验组与对照组间比较有显著差异(plt;0.05)见表1。表1 hbvdna pcr定量对数值与自身抗体检测结果比较表2 肝酶谱与自身抗体结果比较
2.3 hbvdna pcr定量对数值的变化与肝细胞的损伤呈正比关系见表3。表3 hbvdna pcr定量对数值与肝酶谱检测结果比较
3 讨论
实验通过hbvdna实时荧光pcr定量不同对数值和肝酶谱与多种自身抗体联合检测,发现随hbvdna定量对数值梯度和肝脏酶学的升高,aca、amsa、ana抗体的阳性率均有不同程度的增加;检出阳性率显著高于健康对照组(plt;0.05),这可能是乙型肝炎患者在实时荧光hbvpcr定量高对数值区容易产生aca、amsa和ana抗体自身免疫应答反应,而这一应答关系是由于aca、asma和ana的靶抗原分别存在于细胞膜和线粒体膜、肌动蛋白和真核细???的核成份中[3],当肝细胞调节功能受损时hbv可激发aca、asma和ana产生免疫应答和免疫病理反应,引起肝细胞的进一步损害,这表明作为靶抗原的自身抗体在肝细胞的损伤中起着较为重要作用。
通过45例乙肝患者aca、amsa和ana的检测,显示与hbvdna实时荧光定量pcr结果成对应关系的aca有8例,阳性率为17.78%;amsa7例,阳性率为15.56%;ana10例,阳性率为22.23%;与肝酶谱alt、ast、ggt的关系表现为
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