核心期刊论文产甲壳素酶菌株的筛选与诱变.PDFVIP

中国月期刊咨询网 核心期刊论文产甲壳素酶菌株的筛选与诱变 核心期刊代发论文期刊推荐《植物生态学报》 立足国内，是植物生态学领域在国内本学科一流期刊。我国报道生态学方面的杂志中国科学院有5种期刊 ，其它主管单位有4种，共9 种刊。植物 学期刊有11个，《植物生态学报》是唯一的一种全面报道植物生 态学科各个领域最新研究及其进展的期刊，在科技期刊结构层位上具有不可代替的作用。 摘要：以胶体甲壳素作为惟一碳源，从自然界微生物中筛选并诱导到一株产甲壳素酶活性较高的菌株，经16S rDNA鉴定为Aeromonas sp.。并以该菌株作为出发菌株，经过一次紫外诱变，酶活是初筛菌株的1.48倍。再经过二次紫 外诱变或者紫外-LiCl复合诱变，酶活分别是初筛菌株的3.16和3.87倍，最高酶活达到3.48 U/mL。最后通过连续传代培养，确定了菌株HMX-16经过紫外和复合诱变后突变性状稳定性良好。 关键词：甲壳素酶,紫外诱变,紫外-LiCl复合诱变,产酶活性 DOI：10.14088/ki.issn0439-8114.2015.05.009 Abstract： A chitinase-producing strain was isolated and induced from various wild type microorganisms with colloidal chitin as the sole carbon source， and identified as Aeromonas sp. by 16S rDNA. After first ultraviolet (UV) mutagensis， the highest chitinase production of the mutated strain was increased by 1.48 times. After the second UV mutagenesis or UV-LiCl mutagenesis，the highest chitinase activity were increased by 3.16 and 3.86 times. The highest activity was increased to 3.48U/mL. The strain HMX-16 obtained with the best activity had good genetic stability after UV and UV-LiCl mutagenesis. Key words： chitinase; UV mutagenesis; UV-LiCl mutagenesis; chitinase production 甲壳素作为一种结构多糖在自然界分布广泛，广泛存在于甲壳动物的外壳、节肢动物的骨骼以及真菌和藻类的细胞壁 中，是地球上除纤维素外的二大生物资源，也是保健食品、医用材料和化妆品工业的重要原料[1，2]。由于甲壳素分 子很大，分子之间存在强烈的分子间和分子内氢键作用，很难溶于酸、碱和一般的有机溶剂，从而大大限制了甲壳素 的应用。和大分子甲壳素相比，甲壳低聚糖无毒、易被人体吸收，并具有抗肿瘤、增强免疫力、抗菌、降胆固醇、保 湿及促进植物抗逆生长等多种生理功能，在食品、医药、农业等领域有着广泛的应用前景，成为近年来的研究热点[3 ]。酶法生产甲壳低聚糖具有条件温和、水解反应易于控制、不造成环境污染等优点，特别是专一性酶亲和力强，选 择性高，产品质量好，所以，采用酶法降解甲壳素一直是目前国内外研究的热点[4]。但目前专一性甲壳素酶价格昂 贵，活性较低，难以商品化，因此寻求高活性的产甲壳素酶菌株仍是目前甲壳低聚糖研究和应用开发的关键[5]。 甲壳素酶(Chitinase，EC.4)是一类能催化降解甲壳素β-1，4?蛳糖苷键的水解酶，可以根据其酶切位置不同，分 为内切甲壳素酶和外切甲壳素酶，外切甲壳素酶可分为甲壳二糖酶和N-乙酰氨基葡萄糖酶。甲壳素酶广泛存在于动 物、植物以及微生物(细菌、放线菌、真菌)中[6]，据统计，迄今已发现约50个属近100种甲壳素酶产生菌[7-9]，在植 物病虫害防治和甲壳素生物资源利用等领域有广泛的应用前景。目前，虽然已经从多种微生物中分离出甲壳素酶，但 大多数产酶能力都较低。而诱变育种是筛选菌株最常用的方式之一[10，11]。紫外线辐照是一种较为常用的物理诱变 方式，操作方便、安全，没有化学诱变剂毒性，对原核生物而言是一种比较好的诱变因素。氯化锂是一种碱金属卤化 物，单独使用是一种弱诱变