硫酸铵盐析法分级分离大豆酸沉蛋白.pdfVIP

第 卷 第 期 河南师范大学学报 自然科学版 ３９ 　 ６ （ ） 　 Ｖｏｌ．３９　Ｎｏ．６ 年 月 ２０１１ １１ Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｈｅｎａｎ　Ｎｏｒｍａｌ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ（Ｎａｔｕｒａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ） 　 Ｎｏｖ．２０１１ 　　文章编号：１０００－２３６７（２０１１）０６－００９９－０２ 硫酸铵盐析法分级分离大豆酸沉蛋白 张 煜 王建英 王晶妍 　 ， ， （内蒙古科技大学，内蒙古 包头 ０１４０１０） 摘 要 　 ：利用硫酸铵盐析法分级分离大豆中的酸沉蛋白，并通过 ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行分析，初 步确定可达到分级分离效果时的硫酸铵溶液饱和度。 关键词：大豆酸沉蛋白；硫酸铵盐析法；分级分离 中图分类号 文献标志码 ：Ｑ５３３ ：Ａ 大豆蛋白根据其溶解特性可分为两类 清蛋白与球蛋白 其中球蛋白因加酸调 至其等电点 ［１］时可沉淀析出 故又 ： ， ｐＨ ４．５ ， 称酸沉蛋白 提取大豆酸沉蛋白一般采用 碱提酸沉 法 即通过调整大豆蛋白溶液 值至碱性 使酸沉蛋白溶于水相 离心 ． “ ” ， ｐＨ ， ， 取上清液 在上清液中加入酸调整溶液 至酸沉蛋白的等电点 可使酸沉蛋白沉淀下来 这种方法在获得酸沉蛋白的同时可 ， ｐＨ ， ． 去除大豆蛋白中的可溶性纤维、糖分、脂肪、矿物元素等［２］． 大豆蛋白的功能特性与其相对分子量大小有关，不同分子量的大豆蛋白具有不同的加工功能特性和生理功能特性［３］。 目前分离大豆蛋白的方法有膜分离法［４］、超声波辅助反胶束萃取分离法［５］、反相高效液相色谱法等，但这些分离方法其工艺 过程相对繁琐耗时，且成本较高．而硫酸铵盐析法通过调整溶液中硫酸铵的加入量来控制蛋白质的水和程度，使不同大小的 蛋白质先后析出，可在短时间内实现酸沉蛋白的分级分离，且硫酸铵成本较低．本研究利用硫酸铵盐析法分级分离大豆中的 酸沉蛋白，并通过 ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳技术进行分析． 材料和方法 １　 材料与主要试剂 １．１　 大豆 －１的 稀 含 丙酮 无水硫酸铵 丙烯酰胺 考马斯亮蓝 ，２ｍｏｌ·Ｌ ＮａＯ