成纤维细胞生长因子信号分子的结构和功能的论文.docVIP

　　成纤维细胞生长因子信号分子的结构和功能的论文 作者：姜笃银 早期研究使用的成纤维细胞生长因子（fgfs）主要来自牛脑和脑垂体的提取液，是大约150个氨基酸结构的酸性或碱性成纤维细胞生长因子（afgf：fgf1或bfgf：fgf2）。其后分离的癌基因产物的细胞增殖因子与上述fgfs结构类似，也被分类在fgfs家族，并依次命名为fgf3~9〔1〕。目前已发现23种fgfs。现主要就多能fgfs结构和相关功能机制的研究进展进行综述。 1发现和鉴定新的fgfs结构 　　fgfs作为细胞间信号分子在胚胎发生和分化过程中起重要作用。fgfs是由约150~200氨基酸组成的多肽，相互之间的氨基酸序列有20%~50%是相同的〔2,3〕。其中心区域有大约120个氨基酸序列存在高度的同源性（30%~70%）。利用该区域的同源性，以人、小鼠或大鼠cdna和基因组dna为模板、采用同源序列pcr法进行新fgfs基因检测。当然，还可以??用t7噬菌体cdna显示法鉴定新fgfs。fgfs受体(fgfrs)是典型的膜结合酪氨酸激酶型受体。将fgfrs的胞外结构域在杆状病毒群（baculovirus）表达株表达，制成重组的细胞外结构域（可溶性fgf受体）。.进而利用可溶性fgfrs与配体结合的特性，通过t7噬菌体cdna显示法对互补cdna文库进行筛选。 　　通过同源序列pcr法，已经发现了6种新的fgfs基因（fgf10、fgf16、fgf17、fgf18、fgf20、fgf21）〔4〕。虽然t7噬菌体cdna显示法能获得较多的阳性克隆，但不能确认是新发现的fgfs。随着人类基因组结构的解析及其dna数据库被公开，通过基因检索进而又发现3种新的fgfs基因（fgf19、fgf22、fgf23）〔5,6〕，并发现fgf-22mrna选择性表达于皮肤毛囊的内毛根鞘〔7〕。加上在探索视网膜特异性表达基因的过程中所发现的4种新的fgfs基因（即fgf11、fgf12、fgf13和fgf14）〔1〕，以及mcerichomeodomainoncoprotein）e2a-pbx1下游目标过程中发现的fgf15，迄今共鉴定出23种人或鼠fgfs。但是人fgf15和小鼠fgf19尚未被证实。人fgf19与小鼠fgf15显示很高的同源性（约50%），且这两种基因都跟fgf3、fgf4基因的染色体邻接〔3〕，由此推断人fgf19是小鼠fgf15的相同体。由于人与小鼠其他fgfs结构之间的同源性达90%以上，因而除非fgf15和fgf19在进化过程中意外地发生大的变异，否则两者将伴随着进化过程而逐渐消失。 2fgfs家族成员和基因定位 　　在人类的fgfs中，能细分出fgf7、fgf10、fgf22和fgf9、fgf16、fgf20等许多亚科(subfamily)。fgfs亚科与各染色体定位之间无明显的相关性，人类fgfs基因多数散在分布于全基因组中。但也有一些fgfs基因在基因组上形成群落，如fgf3、fgf4和fgf19位于染色体11q13，fgf6、fgf23位于染色体13p13，而fgf17、fgf20则位于染色体8p21-p22相互邻接位置上。由此推断fgfs基因家族是在进化、复制和易位等复杂过程中形成的〔1〕。人类fgfs基因的翻译区域多数由3个基因构成相似的外显子(exon)构成。但在fgf11~14的翻译区域是由5个外显子构成的〔3〕，fgfs基因翻译区域的大小约5~100kb。此外，部分fgfs可通过机制不清的选择性剪接（alternativesplicing）形成fgfs亚型。 　　fgfs可以分为几个亚组，fgf10和fgf7同属于角朊细胞生长因子(kgf)组。除了fgf15外，以22种人类fgfs氨基酸序列的中心区域为基础制成以上进化系统树(fgf15使用小鼠的氨基酸序列)。树中横线显示氨基酸序列偏离程度，箭头所指为人类fgfs在染色体上的位置〔３，６〕(注：人类fgf15基因和fgf16基因位置未确定)。 　　多数fgfs（fgf3~8、10、15、17~19、21~23）的n末端具有典型的信号序列分泌蛋白。然而fgf19、fgf16和fgf20虽然没有明确的信号序列却能高效地分泌到细胞外〔3〕。fgf1和fgf2也缺乏信号序列和正常的分泌途径，却能出现在胞外基质，推测两者可能来自受伤的细胞，或者通过与内质网-高尔基体通路不同的细胞脱颗粒机制进行释放。此外，fgf11~14没有信号序列，认为这些fgfs被储留在胞内〔1〕。 　　fgfs不仅存在于脊椎动物体内，也存在于无脊椎动物体内。通过基因组的解读，在果蝇和c.elegans分别找到1种fgf(branchless)〔1〕和2种fgfs(egl-17和l