高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊37的含量.docVIP

PAGE  -  PAGE 5 - 高效液相色谱法测定冠心丹参胶囊三七的含量 杨丽(包头中药有限责任公司 包头 014040) 摘要：冠心丹参胶囊为国家中药保护品种, 由丹参、三七、降香油三味组成，具有活血化瘀，理气止痛的药理作用，临床用于气滞血瘀所致的胸痹，症见胸闷刺痛、心悸气短；冠心病心绞痛见上述证候者。冠心丹参胶囊对冠心病病情轻度及中度者疗效较好，且安全、可靠，无毒副作用。原质量标准只有丹参一项含量测定，为更好地控制产品质量，保证产品的疗效，作者建立了专属性好的人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、三七皂苷R1高效液相色谱法同时测定含量的方法，适用于本制剂的质量控制。 1仪器与试药. 仪器 L-2000高效液相色谱系统（日立公司）,电子天平(BP211D) 药品 冠心丹参胶囊批号：060516，060622，060625，060626；对照品：三七皂苷R1（110745-200312）、人参皂苷Rg1（110703-200424）和人参皂苷Rb1（110704-200420）、购自中国药品生物制品检定所。其他试剂均为色谱纯、分析纯。 2方法与结果 2.1色谱条件与系统适用性试验 仪器 固定相 BDS C18柱（250×4.6mm，5μm） 流动相 A相：50%乙腈，B相：水；按如下程序梯度洗脱： 时间（min）012110111A45457245B55552855对照品溶液的制备 精密称取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品和三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1ml含人参皂苷Rg1 0.4mg、人参皂苷Rb1 0.4mg、三七皂苷R1 0.2mg的混合溶液，即得。 供试品溶液的制备 取装量差异项下的本品内容物，研细（过四号筛），取约1g，精密称定，精密加入甲醇50ml，称定重量，放置过夜，置80℃水浴上保持微沸2小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 阴性溶液的制备 取不加三七药材的本品,同法制成阴性对照溶液. 作者简介:杨丽 女从事中药研发工作 大学本科 学士学位 Tel:0472-4616327 Email:nmgbtyangli.@163 分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，测定，阴性无干扰，色谱图见图1。 对照猫画虎 样品 阴性 图1 2.2线性关系考察 配制含三七皂苷R1，人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1对照品各约0.2mg/ml，0.4mg/ml和0.4mg/ml的甲醇溶液，摇匀，精密量取2、8、12、16、20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积对进样量回归得标准曲线，结果见表2～表4。 表2 三七皂苷R1 HPLC法测定结果 进样量m（μg）0.2480.9921.4881.9842.48峰面积A（μv.s）963206404534362900678341483结果，三七皂苷R1在0.248～2.48μg范围内，峰面积与进样量线性关系良好, r = 0.9998。 表3 人参皂苷Rg1 HPLC法测定结果 进样量m（μg）0.7322.9284.3925.8567.32峰面积A（μv.s）997303433382767236829024725由表中数据可见，当进样量为0.732～7.32μg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r = 0.9998。 表4 人参皂苷Rb1 HPLC法测定结果 进样量m（μg）0.8423.3685.0526.7368.842峰面积A（μv.s）2773371363140212315928921573702300由表中数据可见，当进样量为0.842～8.842μg范围内时，峰面积与进样量线性关系良好,r=0.9996。 2.3精密度试验 取含量测定项下对照品溶液，连续测定5次，记录色谱图，计算平均值及相对标准偏差，结果见表5。 表5 精密度试验结果 进样序号三七皂苷R1人参皂苷Rg1人参皂苷Rb1118111355960005550302021846872596529155671803188556459277585503492418952745983631550306351889334592056855101846189152859363545494432186995159489345513562RSD（%）1.810.410.492.4稳定性试验 取含量测定项下对照品溶液在8小时内连续进样5次，记录峰面积，结果见表6。 表6 稳定性试验结果 时间（h）