柔红霉素 盐酸多柔比星和盐酸表柔比星的HPLC分析的论文.docVIP

　　柔红霉素 盐酸多柔比星和盐酸表柔比星的HPLC分析的论文 作者：石涛 陈莎莎 朱宇鹏 尚广东 【摘要】 目的：建立柔红霉素、盐酸多柔比星和盐酸表柔比星的高效液相色谱分析方法。方法：色谱柱为agilent hc-c18(250 mm×4.6 mm ,5 m)；柱温为30 oc；流速为1.0 ml·min-1；流动相为十二烷基硫酸钠溶液-乙腈-甲醇(500∶500∶60，用磷酸调ph 2.2)；检测波长为254 nm。结果：柔红霉素保留时间19.7 min，盐酸多柔比星保留时间10.9 min，盐酸表柔比星保留时间12.4 min；三种化合物进样量在0.1 2 g范围内与峰面积积分值呈良好线性关系；平均回收率为98.4 %~99.0 %，rsd为0.45 %(n=5)；结论：本方法灵敏度高、准确，可以对盐酸多柔比星类化合物进行定性定量分析。 【关键词】 柔红霉素；盐酸多柔比星；盐酸表柔比星；高效液相色谱法 【abstract】 objective: to establish a hplc method for the analysis of daunorubicin, doxorubicin and epirubicin. methods: the determination ed by hplc using agilent hc-c18 column (250 mm x4.6 mm ,5 m) n temperature maintained at 30 oc. the mobile phase consisted of sds-acetonitrile-methanol (500∶500∶60, ajust ph 2.2 l·min-1 and a uv detection . results: the daunorubicin retention time is 19.7 min ,the doxorubicin retention time is 10.9 min ,the epirubicin retention time is 12.4 min; the linear range of the three pounds ethod is sensitive, accurate, and it can be used for the qualitative and quantitative analysis of daunorubicin, doxorubicin and epirubicin. 【key a公司，批号：038k1349），注射用盐酸表柔比星（盐酸表柔比星样品，浙江海正药业股份有限公司，批号：090803）；甲醇、乙腈为色谱级，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件:色谱柱：agilent hc-c18 (250 mm×4.6 mm ,5μm)；柱温：30 oc；流速：1.0 ml·min-1；流动相：十二烷基硫酸钠溶液（1.44 g+0.68 ml h3po4+h2o+500ml, 用磷酸调ph 2.2）-乙腈-甲醇(500∶500∶60)，检测波长254 nm；进样体积20μl。结果，在此条件下柔红霉素与盐酸多柔比星、盐酸表柔比星色谱峰可基线分离，柔红霉素保留时间19.7 min，盐酸多柔比星保留时间10.9 min，盐酸表柔比星保留时间12.4 min。该条件的建立为盐酸多柔比星类化合物进行定性分析奠定了基础（色谱见图1）。 2.2 样品溶液的制备:称取柔红霉素、盐酸多柔比星和盐酸表柔比星样品各1 mg，用水溶解配置各自储存液1 mg·ml-1即1μg·μl -1。 2.3 线性关系的考察:精密吸取样品溶液2.5、5、10、25、50、100μl，分别置于 1.5 ml eppendorf管中，用流动相稀释至1 ml，摇匀，精密吸取系列溶液各20μl，注入液相色谱仪，测定峰面积。以进样量（x,μg）为横坐标，峰面积的积分值（y）为纵坐标进行线性回归，得到回归方程及线性范围，回归方程的建立为盐酸多柔比星类化合物的定量分析奠定基础。结果见表1。 图1 高效液相色谱 a.柔红霉素；b.盐酸多柔比星；c.盐酸表柔比星；d.三种标准品的混合物：1，盐酸多柔比星；2，盐酸表柔比星；3，柔红霉素 表1 回归方程及线性范围 2.4 最低检测限测定:将样品溶液逐步稀释，直至信噪比(s/ n) ≥3 ,此时的进样浓度即为检测限。以s/ n = 3 :1 确定的柔红霉素、盐酸多柔比星、盐酸表柔比星的最低检测浓度均为2.5μg·ml-1，检测限为50 ng。 2.5 稳定性试验:取同一样品溶液