遗传学实验选编.ppt

遗传学实验;实验目录;实验一：减数分裂的观察;减数分裂各期特征：;1、细线期和2、偶线期; 3、粗线期特点：又称重组期，开始于同源染色体配对完成后，n个染色体（配对的染色体称二价体）进一步变短变粗，SC（联会复合体）仍然存在，同源染色体的非姊妹染色体间可以发生局部交叉和交换，核仁大。;3、粗线期; 4、双线期特点：又称合成期，可见四分体。染色体进一步缩短，组成二价体的两条同源染色体表现相斥而分离，但由于同源染色体之间的交换尚未完成，因而在不同的二价体上，在不同的部位，不同程度出现交叉现象，使二价体成为“X、V、8、0”等形状。;4、双线期; 5、终变期特点：又称再凝集期。四分体较均匀地分布在核中，交叉向染色体臂的端部移行，称为端化。染色体凝集成短棒状。;5、终变期;中期I： 纺锤体形成，排在赤道板上的二价体开始分离，交叉端移。;后期I： 二价体中的同源染色体分开，真正减数。末期I：;前期II：中期II：具有两个染色单体的染色体 排在赤道板上。;后期II： 着丝粒纵裂，姐妹染色单体分开。;末期：染色体解旋，核膜重建等。;实验报告;实验二、果蝇培养及主要性状观察;刚毛类型：;;二、雌雄果蝇的鉴别： 性别 体型 腹部末端 背部条纹 性梳 雌性 大 无色、端尖 7条（可见5条） 无 雄性 小 黑色、钝圆 5条（可见3条） 有 性梳：雄果蝇前翅第5节跗节上10根象梳子的棕毛;These two flies are both of the wild type for all traits. This means that they have all of the so-called normal alleles found in a natural population, and do not have any mutant genes.;三、果蝇培养基的配制;三、果蝇培养基的配制;三、果蝇培养基的配制;实验三~六：果蝇杂交实验验证遗传学基本规律;正交组合; 反交组合;统计分析;实验七：果蝇唾液腺染色体的制备和观察;实验七：果蝇唾液腺染色体的制备和观察;实验七：果蝇唾液腺染色体的制备和观察;3.剔除完脂肪体后，滴1滴1N HCL 浸润1min使细胞膜变脆。而后小心将唾液腺转移到另一干净载玻片上 ，或小心将唾液腺周围的垃圾摖干净，然后滴上一滴醋酸洋红染色液，染色10min。 4.盖上盖玻片，然后平放在实验桌上，用大拇指压下盖玻片，用力要适当，避免将玻片压碎，又要尽可能地将细胞压散。 5.显微镜下观察制好唾液腺染色体的压片。;实验报告： 绘制所观察到的分散较好的唾液腺染色体图像。;实验八：核型分析;实验步骤：;实验步骤;实验步骤;实验报告;核型分析方法;核型分析方法;核型分析方法;实验目的：; 聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺（Acr）和交联剂又称为共聚体的Ｎ，Ｎ－甲叉双丙烯酰胺（Bis）在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶，以此凝胶为支持物的电泳为聚丙烯酰胺凝胶电泳 PolyAcrylamide Gel Electrophoresis（PAGE）。 聚丙烯酰胺凝胶的优点： 1）化学性能稳定，对pH和温度变化不敏感； 2）重复性好； 3）灵敏度高，可达10-6 g； 4）分辨率高。 ;原理：; 同工酶是指能够催化相同的化学反应，但酶分子结构、理化特性乃至免疫学性质不同的一组酶。 它们是由遗传体系决定的即相同的基因在不同组织中表达的蛋白质作用相同,但分子结构、理化特性等不同.由于同工酶存在蛋白结构及理化性质的差异，在电泳时条带略有差异,因此可用电泳将它们分离开来。 生物体内存在多种同工酶,其中最经典的是乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase)简称LDH。;试剂：;器材：;操作方法：;4.样品制备： 取材：鲫鱼若干条，解剖取1.肠、2.眼睛、3.卵、4.肉、　　　5.胆、6.胰、7.鳃、8.肝、9.心脏　放入冰箱保存。 提取酶：取不同组织块，加入提取缓冲液tris-Hcl(pH=7.0)　　此溶液需４℃预冷，组织重量（g）与缓冲液体积（mL）之比为１：５。用玻璃匀浆机冰浴中匀浆。匀浆液４℃离心约３０分钟，１５０００转／分钟。 取上清液用１５０ul离心管分装，加１００ul 甘油和１０　　ul溴芬蓝混匀即可点样。 5.加样： 作为分析用的PAGE加样量仅需几微克。用微量注射器取20