慢病毒包装手册..pdfVIP

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慢病毒包装手册.

基因时代()为生命科学提供源动力! 吉凯基因化学有限公司 慢病毒包装手册 吉凯基因 2008 年 4 月 基因时代()为生命科学提供源动力! 吉凯基因化学有限公司 目 录 慢病毒系统简介…………………………………………………………………………………3 实验流程描述……………………………………………………………………………………5 实验材料…………………………………………………………………………………………6 病毒包装细胞 293T 的培养…………………………………………………………………7 Lentivirus 病毒包装……………………………………………………………………………8 病毒的收获及浓缩……………………………………………………………………………9 Lentivirus 滴度测定…………………………………………………………………………11 1) 孔稀释法测定滴度…………………………………………………………………………11 2) Real time 定量 PCR 法测定滴度…………………………………………………………14 示例: Real-time 定量 PCR 法测定 GFP-tagged 慢病毒……………………………………17 参考文献………………………………………………………………………………………20 地址:上海张江高科技园区蔡伦路 720 弄 1 号楼 517 室 电话: 86-21 邮编:201203 传真: 86-21 网址: Email: service@ 2 基因时代()为生命科学提供源动力! 吉凯基因化学有限公司 慢病毒系统简介 慢病毒(Lentivirus)载体是以人类免疫缺陷型病毒(HIV)为基础发展起来的基因治疗 载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力,并可以在体内较长期的表达且安全性高。 吉凯基因提供的 Lentivirus 为“自杀”性病毒,即病毒感染目的细胞后不会再感染其他细胞, 也不会利用宿主细胞产生新的病毒颗粒。Lentivirus 中的毒性基因已经被剔除并被外源性目 的基因所取代,属于假型病毒。但该病毒仍然具有可能的潜在的生物学危险,吉凯基因建议 不要使用编码已知或可能会致癌的基因的假型病毒,除非已经完全公认某个基因肯定没有致 癌性,否则均不建议采用假型病毒进行生物学实验。

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