DNA的损伤修复及突变探究.pptVIP

第五章 DNA的损伤、修复和突变;第一节 DNA的损伤;;DNA存储着生物体赖以生存和繁衍的遗传信息，维护DNA分子的完整性对细胞至关紧要； 修复DNA损伤的能力是生物能保持遗传稳定性所在； DNA分子的变化并不是全部都能被修复成原样的，因此生物才会有变异、有进化。; 细胞内在的因素和环境中的因素都可能导致DNA损伤，根据损伤的原因可以分为： DNA分子自发性损伤 物理因素导致的DNA损伤 化学因素导致的DNA损伤 ;一、 DNA分子自发性损伤;1. 碱基的互变异构;同型异构体转换;同型异构体转换;10;异构互变造成的复制损伤;2. 碱基的脱氨基作用;13;3. 脱嘌呤与脱嘧啶 (碱基丢失);4. 活性氧引起的碱基修饰与链断裂;16;二、物理因素引起的DNA损伤;1. 紫外线（UV）引起的DNA损伤;紫外线引起的DNA损伤 －－最易形成胸腺嘧啶二聚体（TT）;; DNA链断裂 脱氧核糖破坏或磷酸二酯键断开而导致DNA链断裂。 一条链断裂称单链断裂（single strand broken）； DNA双链在同一处或相近处断裂称为双链断裂（double strand broken ）。;交联（binding）;辐射引起DNA分子结构的多种变化;碱基类似物、修饰剂对DNA的损伤； 2. 烷化剂对DNA的损伤； 3. 嵌合剂对DNA的损伤。 ;1. 碱基类似物对DNA的损伤 某些化学物质和正常的碱基在结构上类似，有时会替代正常碱基而掺入DNA分子，一旦这些碱基类似物进人DNA后，由于它们的配对能力不同于正常碱基，便引起DNA复制过程中其对应位置上插入不正确碱基。 　;　　例如 5-溴尿嘧啶（BU）和 5-溴脱氧尿嘧啶（BrdU）是T结构类似物。细菌在含BU的培养基中培养时，部分DNA中的T被BU取代，BU有两种互变异构体，一种是酮式结构（第6位上有一个酮基），它可以代替T而掺入DNA，并与A配对；当BU发生互变异构成为烯醇式（第6位上是一个羟基）后，就容易和G配对。 通常以酮式存在，有时也以烯醇式存在。当BU先以酮式掺入DNA，继而又变成烯醇式时，进一步复制使DNA中 A- T对变成 G- C对。同样道理也引起 G- C向 A- T的转换，BU可以使细菌的突变率提高近万倍。; 除BU外，还有5-溴脱氧尿苷、5-氟尿嘧啶、5-氯尿嘧啶及它们的脱氧核苷。 另一种被广泛应用的碱基类似物是2-氨基嘌呤（2-AP），是一种腺嘌呤A类似物，可和胸腺嘧啶T配对。可再和胞嘧啶C 配对，产生A-T 、G-C的转换，或2-AP以和胞嘧啶C 配对形式进入DNA后再和胸腺嘧啶T 配对后产生G-C、A-T的转换。;2. 烷化剂引起的DNA损伤（特异性错配） 某些诱变剂不掺入DNA，而通过改变碱基的结构从而引起特异性错配，如烷化剂（是一类亲电子的化合物，具有一个或多个活性烷基）。它们的诱变作用是使DNA中的碱基烷化。 活性烷基不稳定，能转移到其他分子的电子密度较高的位置上，并置换其中的氢原子，使其成为不稳定的物质。 烷化剂的种类很多，常见的有甲磺酸乙酯（EMS）、亚硝基胍（NG）和芥子气等。; EMS能使鸟嘌呤的 N位置上有乙基，成为7一乙基鸟嘌呤。与胸腺嘧啶配对，故能使G-C转换成A-T。 　 烷化剂的另一作用是脱嘌呤。例如烷基在鸟嘌呤N位上活化糖苷键引起断裂，使嘌呤从DNA链上脱掉，产生缺口。复制时，与缺口对应的位点上可能配上任一碱基，从而引起转换或颠换；而且去嘌呤后的DNA容易发生断裂，引起缺失或其他突变。;3. 嵌合剂的致突变作用 　　 嵌合染料是另一类重要的DNA修饰剂。包括吖啶橙（acridine orange）、原黄素（proflavin）、溴化乙锭（EB）等染料。 这些试剂为平面分子，其分子大小与碱基对大小差不多，可以嵌入到DNA双链碱基对之间，在嵌入位置上引起单个碱基对的插入或缺失突变。嵌合染料也能嵌入单链DNA的碱基之间，这些突变都会引起阅读框的改变，造成移码突变。　;荧光显微镜下（选用蓝色激发滤片），可见含DNA的细胞核显示黄绿色荧光，含RNA的细胞质及核仁显示橘红色荧光。;第二节 DNA的突变; 如果DNA的损伤得不到有效的修复，就会造成DNA分子上可遗传的永久性结构变化，称为突变（mutation）。少数突变甚至有可能对细胞是有利的。有利突变的累积可以使生物进化，使其能更好地适合于其生存的环境。但绝大部分突变是有害的，对于单细胞生物，不少有害突变是致死的，对于多细胞的高等生物，有害突变会造成病变，如代谢病和肿瘤。 ;导致DNA分子结构变化（亦即发