姜黄素下调脊髓Toll样受体4及下游细胞因子.PDFVIP

姜黄素下调脊髓 Toll样受体 4及下游细胞因子 减弱大鼠神经病理性痛 * 顾洪丰 1, 2)** 廖端芳 3) 唐小卿 2) 旷 昕 4) (1)南华大学心血管病研究所，湖南省动脉粥样硬化重点实验室，衡阳 421001；2)南华大学生理学教研室，衡阳 421001； 3)湖南中医药大学干细胞中药调控与应用研究室，长沙 410208；4)南华附属第一医院麻醉科，衡阳 421001) 摘要 观察鞘内注射姜黄素对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)大鼠痛阈和脊髓组织 Toll样受体 4(TLR4)及 TNF-琢、IL-1茁和 IL-10表达的影响．鞘内置管的 120只大鼠随机均分为 4 组：假手术组(Sham)，CCI组，溶剂对照组(SC)，姜黄素治疗组 (Cur，100 滋g/天)，建立 CCI大鼠疼痛模型，术后第 1、3、7、10和 14天鞘内给药并测定痛阈，第 3、7天取腰段脊髓第 4～ 6节段(L4～L6)以 Real-time PCR与 Western blotting方法检测 TLR4、HMGB1 mRNA和蛋白质的表达，ELISA法观察脊 髓组织中 TNF-琢、IL-1茁及 IL-10表达变化．与 Sham组相比，CCI组大鼠机械性痛阈与热痛阈显著降低(均 P 0.05)，同时 脊髓组织 TLR4、HMGB1 mRNA 和蛋白质的表达明显增加 (均 P 0.05)，TNF-琢、 IL-1茁 与 IL-10 的含量也明显升高 (均 P 0.05)；鞘内注射姜黄素明显降低脊髓 TLR4、高迁移率族蛋白 1(HMGB1)，TNF-琢和 IL-1茁的表达，显著升高脊髓 IL-10 的表达，同时明显改善 CCI大鼠疼痛行为(P 0.05)．姜黄素减轻神经病理性疼痛可能与下调 TLR4途径促炎症因子表达有 关，抑制 TLR4途径有望成为治疗神经病理性疼痛的新策略． 关键词 姜黄素， Toll样受体 4，免疫应答，神经病理性疼痛 学科分类号 R614 DOI: 10.3724/SP.J.1206.2011.00521 生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biophysics 2012, 39(7): 655~661 * 国家自然科学基金和湖南省教育厅基金(09C835)资助 项目. **通讯联系人. Tel: 0734-8281389, E-mail: ghf513@ 收稿日期：2011-11-08，接受日期：2012-02-13 神经病理性痛(neuropathic pain，NPP)以痛觉 过敏(hyperglesia)、触诱发痛(allodynia)和自发性疼 痛为特征，通常由外周神经、背根神经节(DRG)、 脊髓以及脑损伤所致[1-2]．神经病理性痛是一个棘 手的临床问题，现有的疼痛治疗方法均无显著疗 效，给患者带来了极大的痛苦，主要是对其确切病 理学机制目前尚未明确．近年来，人们开始关注神 经胶质细胞 / 神经元的信号转导以及中枢神经系 统对神经损伤的免疫应答在神经性痛中的作用与机 制[3-4]．研究发现，中枢神经系统内致炎症因子(如 TNF-琢，IL-1茁与 IL-6等)表达增加与神经性痛中的 小胶质细胞激活、疼痛过敏以及神经免疫激活有 关，正是这些细胞因子级联反应导致了痛觉过敏的 发生[5]．Toll样受体 4(Toll-like receptor 4, TLR4)是 一种与免疫性或炎症性疾病关系密切的模式识别受 体，内、外源性配体与其结合后，通过激活 NF-资B 等信号途径生成与释放大量的炎症因子 [6]．我们 先前的研究表明，坐骨神经结扎大鼠 (chronic constrictive injury，CCI)脊髓中的 TLR4 表达显著 上调．这些资料提示 TLR4在感染等所致的疼痛中 可能有着重要作用． 姜黄素(curcumin)具有抗炎，抑制肿瘤、抗氧 化等作用．国内已有报道[7]指出姜黄素能减轻 CCI 大鼠疼痛行为，然而对其机制尚不清楚，有待进一 步研究阐明．本研究拟通过鞘内注射 TLR4的阻断 剂姜黄素，观察其对 CCI神经病理性痛模型大鼠 疼痛行为学的变化，对 TLR4及 TNF-琢，IL-1茁与 IL-10 表达的影响，以探讨姜黄素是否通过抑制 TLR4途径的基因表达而减轻神经病理性疼痛，为 防治神经病理性疼痛提供新策略． 生物化学与生物物理进展 Prog. Biochem. Biophys. 2012; 39 (7) 1 材料与方法 1援1 实验动物 清洁级健康成年雄性 Sprague-Dawley(SD)大 鼠，体重 250～300 g，由南华大学实验动物中心 提供．动物脊髓取腰段第 4～6节段(L4～L6)． 1援2 主要试