第八章_培养技术创新.ppt

第八章 培养技术与过程建模;发酵控制目的;第一节 微生物发酵类型;一、投料方式不同 1、分批发酵 2、补料分批发酵 3、连续发酵 4、半连续发酵;1、分批培养;分批发酵中微生物的生长;迟滞期：菌体没有分裂只有生长，细胞形态变大，菌种进入新环境，细胞内核酸、酶等稀释，细胞不能分裂； 对数生长期：细胞内与分裂相关的物质达到一定程度，细胞生长代谢活性最强，细胞开始分裂，呈几何级数增加； 稳定期：培养液中营养物减少，废物积累，生长速率下降，生成率等于死亡率，细胞总数最高，细胞开始积累贮存物； 死亡期： 细胞死亡率大于生成率，有些细胞开始自溶。; 对于初级代谢产物，在对数生长期初期就开始合成并积累； 而对于次级代谢产物，则在对数生长期后期和稳定期大量合成。;分批培养的优缺点;2、补料分批培养;补料的方式和控制;;补料分批培养的优缺点;缺点：;3、连续培养;连续培养的优缺点;缺点 ：;;杂菌污染问题;生产菌株突变问题;4、半连续培养;半连续培养的优缺点; 1、需氧发酵：抗生素、氨基酸等； 2、厌氧发酵：乙醇、丙酮、乳酸等。;啤酒发酵设备 （厌氧发酵）;1、生长关联型发酵 2、生长部分关联型发酵 3、非生长关联型发酵;1、生长关联型发酵; 产物的形成和菌体的生长相偶联;2、部分生长关联型发酵; 产物的形成和菌体的生长部分偶联;3、非生长关联型发酵; 产物的形成和菌体的生长非偶联; 1、初级代谢产物发酵 2、次级代谢产物发酵;初级代谢：生物细胞在生命活动过程中进行的与菌体的生长、繁殖相关的一类代谢活动。 初级代谢产物：微生物合成的主要供给细胞生长的一类物质，如氨基酸、核苷酸、乙醇、有机酸、多羟基化合物、糖类和维生素等。;注意事项;7.2 工业发酵过程的主要控制参数;常规的发酵条件：;条件控制;表征过程性质的状态参数：;表征过程性质的状态参数：;检测手段不同;发酵参数测定方法的分类;传感器;一些生物传感器:;;带计算机数据采集与控制的反应器;原理：化学或物理信号 电信号 放大 记录显示仪 控制器（与设定参数比较） 发出调节信号 控制器动作;一般监控系统;;;发酵是纯培养过程，无菌要求高， 对传感器有特殊要求： 能经受高压蒸汽灭菌； 结构不能存在灭菌不透的死角，以防染菌（密封性好）； 对测量参数要敏感，且能转换成电信号。（响应快、灵敏）； 性能要稳定，受气泡影响小。;几种常用的在线检测的传感器;实例——pH测量;现代：pH电极;;;温度传感器、耐高温pH和溶氧传感器;通气流量计;电 子 秤;压 力 传 感 器;;蠕动泵补料测量与控制系统;;数字式尾气氧和二氧化碳分析仪;用于过程分析的在线红外分析仪;带pH测控与补料控制的摇床;;;高效液相（HPLC）;发酵车间安装的质谱仪;与微生物发酵有关的参数;物理参数：;化学参数：;生物参数：;第三节 菌体浓度的影响及其控制; 微生物的生长现象与繁殖方式;微生物的数量、状态、代谢情况对产物的生物合成有着重要的影响。 菌体浓度（菌浓）：指单位体积的培养液中菌体的含量； 一般：前期菌浓增长快，中期菌浓基本恒定，补料会引起菌浓波动，这是衡量补料量适合与否的一个参数。;生长的测定 ;1、计数法 ;2、测定细胞重量;营养物消耗分析法 测定培养基中不用于合成代谢产物的营 养物（磷酸盐、硫酸盐等）的消耗，间接表示细胞重量的生长 产物重量分析法 测定培养中途形成的二氧化碳，氢，ATP等产物，由此间接地换算出细胞重量的生长;菌丝形态也能反映菌生长情况;第四节 营养基质的影响及其控制;发酵液中各种营养物质的浓度，特别是碳氮比、无机盐和维生素的浓度，会直接影响菌体的生长和代谢产物的积累。 如：半乳糖苷可使大肠杆菌?-半乳糖苷酶的产量增加1000倍； 枯草杆菌既产淀粉酶，又产蛋白酶，提供葡萄糖，只产生蛋白酶。; 黑曲霉柠檬酸发酵 蔗糖浓度15%-18%，蔗糖同化率97%； 蔗糖浓度20%，只同化92%； 蔗糖浓度低于10%，产柠檬酸少，积累草酸； 蔗糖浓度低于2.5%，不产柠檬酸。;Evaluation only. Created with Aspose.Slides for .NET 3.5 Client Profile 5.2.0.0. Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;一般在发酵中后期为保证产生次级代谢产物，有意使菌体处于半饥饿状态，在营养限制的条件下，维持产生次级代