香根草种质资源耐寒性的变异研究-欢迎来到中国香根草网络.doc

PAGE  PAGE 7 香根草种质资源耐寒性的变异研究 范月君基金项目：国家科技部攻关项目(2004BA522B07-4)、广东省科技攻关项目(2005 及珠海市科技计划项目(ZK[2005]-42和P资助。 ,2 席嘉宾1* 张惠霞３ 杨国柱2 徐远新4 徐晖4 （1. 中山大学生命科学学院, 广东 广州510275） （2. 青海大学草业科学系，青海 西宁 810016） （3. 广东省畜牧技术推广总站, 广东 广州, 510500） （ 4. 广州市立名环境科技有限公司，广东 广州510630） 摘 要：以相对电导率，可溶性糖含量，叶绿素含量和脯氨酸含量的变化为指标，对来自不同国家和地区的14个香根草生态型的耐寒性能进行了实验研究和综合评价。结果表明：香根草各生态型之间的抗寒性存在着较大变异，其中Karnataka, Kandy和Monto 三个生态型的抗寒性和大田冬季性状表现比较优良，优于其它的生态型，有望成为将来优良抗寒品种的原始育种材料。 关键词：香根草；种质资源；耐寒性；变异 香根草(Vetiveria zizanioides)是一种非常优秀的水土保持和环境恢复植物，香根草生态工程技术也曾被国际评估委员会评为全世界71项持续发展技术中最为优秀的项目，目前已广泛地应用在我国南方地区的山坡地水土保持、路基护坡、海滩和河岸固土以及污染治理等领域[1]。冬季的最低气温对香根草的分布与培育有着重要的影响，温度是影响香根草在我国向北方地区推广应用的主要限制因子，就是在我国南方地区，香根草也因为抗寒性等问题，在冬季经常枯黄，严重影响其应用价值。因而如何利用国内外现有的香根草种质资源，发现或培育耐寒性能较好的香根草品系，将有利于扩大香根草的应用范围，并进一步确立其耐粗放管理型、综合性状优良的水保与环境绿化草种的地位。本文以14个来自不同国家和地区的香根草生态型为试验材材，通过比较在不同低温胁迫下其叶片内游离脯氨酸累积、叶绿素和可溶性糖含量变化及质膜相对透性的变化等生理指标，综合评价这些香根草资源的耐寒性能，探讨这些因子对低温胁迫的敏感性及其相关关系，为香根草低温逆境下栽培技术的改进提供理论依据，也为将来进一步培育优良抗寒香根草新品种提供理论依据。 1．材料与方法 1.1 试验材料 课题组多年搜集国内外香根草种质资源，建立了香根草种质资源圃。供试草种为来自该种质资源圃的香根草不同生态型（见表1）。取其生长一致的株体进一步营养繁殖，待全部植株恢复正常生长后用于相关生理指标的测定。 1.2 测定方法 1.2.1 电解质渗透率 按华东师范大学主编的植物生理学试验指导中的方法进行[2]，本实验选取的香根草叶片为大小和颜色一致的倒二叶，处理温度设-20℃、-10℃、-8℃、-5℃、0℃和5℃。 表1 供试香根草各生态型的名称及来源 序号生态型来源1Karnataka印度India2Parit buntar马来西亚Malaysia3Lilongwe马拉维Malawi4Zomba马拉维Malawi5Kandy斯里兰卡Sri Lanka6Sunshine美国USA7Malaysia马来西亚Malaysia8Vetiveria nermorlis广东五华Guangdong Wuhua, China9Hoffman美国USA10Monto澳大利亚Australia11Sabak bernam马来西亚Malaysia12Capital美国USA13Wild广东湛江Guangdong, Zhanjiang, China14Cultivated广东广州Guangdong, Guangzhou, China1.2.2 游离Pro含量侧定 准确称取用去离子水漂洗干净的香根草叶片0.100g，剪碎后放入试管中，加5ml的3％璜基水杨酸溶液，置于沸水浴中浸提10分钟，冷至室温；然后吸取2ml于试管中，再加入2ml水、2ml冰乙酸和4ml2.5％酸性茚三酮溶液（以3:2的冰乙酸和6mol/L磷酸为溶剂配制），置沸水浴中显色60分钟。冷却后，加入4ml甲苯，用旋涡振荡器振荡，以萃取红色物质。静置后，吸取甲苯层于分光光度计520nm测定吸光度。 1.2.3 植物组织中可溶性糖的测定 可溶性糖含量测定用蒽酮法[3] 。 1.2.4 叶绿素的测定 叶绿素含量值采用分光光度法进行测定[4]。重复三次，取平均值。 1.2.5 耐寒性的综合评定 采用隶属函数法对各个品系进行综合评定[5,6]。最后把每一个生态型各指标的抗寒隶属值进行累加，并求平均数，平均数越大，表示抗寒性越强。 2