不同禽源里氏杆菌分离鉴定及同源性比较.pdfVIP

畜牧与兽医 2016 年第 48 卷第 5 期 ? 115 ? 刘茜，汪凯，卢凤英，等.不同禽源里氏杆菌分离鉴定及同源性比较 [J]. 畜牧与兽医， 2016 , 48 (5): 115-118 iu Q, Wang K, Lu F Y, el al. 1时alion ， idenlificalion and homologous comparison of R四merella anatipestifer from d晶renl avian [J]. Animal Husbandry Veterinary Medicine , 2016 , 48 (5): 115 -118 不同禽源里氏杆菌分离鉴定及同源性比较 刘茜，汪凯，卢凤英，潘玲\周杰\刘红梅 (安徽农业大学动物科技学院，安徽合肥 23∞36) 摘要:对安徽部分地区疑似传染性浆膜炎的病鸭、鹅脑组织进行病原菌分离鉴定及病理学观察;经 PCR 鉴定，确定为鸭疫里氏杆菌。分别对 5 株分离菌的 165 rRNA 基因和 OmpA 基因进行核背酸序列测定，同源性分析，构建系统进化树。结果表明: 20 株不同来源鸭疫里氏杆菌的 165 rRNA 基因和 OmpA 基因均分为 2 个群，安徽地区的 5 株分离株在不同群中的不同分支，同源性高达 97.4% -1∞%。 关键词:鸭疫里氏杆菌; 16s rRNA 基因; OmpA 基因;同源性比较 中固分类号: 5858.32 文献标志码 :B 文章编号: 0529-5130(2016 )05-0115-04 鸭疫里氏杆菌 ( Riemerella αnatψestifer ， 简称 Ra) 1. 3 细菌分离鉴定及病理学观察 是引发雏鸭传染性浆膜炎的病原。通常发病于 1 至 8 无菌操作采集病鸭、鹅的脑组织接种至 TSA 培 周龄鸭、鹅，尤其是 2 至 3 周龄，雏鸭鹅最易感，发 养基上，在 CO 2 恒温箱中 37 t培养 48 h 。挑选平板 病率在 10% -60% 之间，病死率可达 30% -90% 以 上细小、透明、奶油状的菌落获纯培养，分离菌经革 上 [IJ 。近年来，本病的发生呈上升趋势，严重危害 兰染色镜检及生化反应鉴定后 4 t保存备用。 我国养鸭业的发展。 Ra 血清型众多。目前在我国已 剖检疑似病鸭、鹅观察病理变化，对典型病变组 发现 16 个血清型 [2J] ，且各血清型之间无交叉保 织进行拍照、留样。 护 [4] ，加上对抗生素易产生耐药性，给本病的预防 取确诊传染性浆膜炎鸭的心脏、肝脏、气囊和脑 和治疗带来很大困难。 病变组织，置 10% 的福尔马林液中固定。经过洗涤、 2014 年对临床上遇到的疑似传染性浆膜炎的鸭、 脱水与透明、透蜡、包埋、修切蜡块等步骤制成石蜡 鹅病例进行了病原分离鉴定及病理学观察。对其中 5 切片，再经贴片、烤片、染色、封片后，镜下观察。 株 Ra 分离菌进行 16S rRNA 基因和 OmpA 基因 PCR 1. 4 PCR 鉴定 鉴定和同源性分析，为本病流行病学研究和疾病防治