高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量的论文.docVIP

　　高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素含量的论文 【摘要】 目的 应用高效液相色谱法测定降脂减肥颗粒中葛根素的含量。方法 采用shim-pack-c18柱(5 μm, 150 mm×4.6 mm),甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)为流动相,流速0.9 ml/min,检测波长为250 nm。结果 线性范围为0.114～0.570 μg,r＝0.999 6,回收率为98.74%,rds＝0.67%。结论 该方法简便、准确、灵敏,可用于该制剂的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法；葛根素；降脂减肥颗粒 abstract：objective to determine the content of puerarin in jiangzhijianfei granules by high performance liquid chromatography. methods the determination -pack-c18 column (5 μm, 150 mm×4.6 mm) and a mobile phase of methanol-0.1% phosphoric acid l/min and the detection . results good linear relationship betount ethod is simple, accurate, sensitive and can be applied to the quality control of the preparation. key onsil-c18柱(5 μm,4.6 mm×150 mm)；流动相为甲醇-0.1%磷酸(25.3∶74.7)；流速：0.9 ml/min；紫外检测波长：250 nm；理论塔板数按葛根素计算,不低于3 000；柱温为室温。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取葛根素对照品适量,加甲醇制成每1 ml含0.05 mg的溶液,摇匀,作为对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　 　　取本品20 g,研细,取1 g,精密称定,加入30%乙醇30 ml,置具塞锥形瓶中,称定重量,超声处理20 min,放冷,再称定重量,以30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。 　　2.4 阴性对照溶液的制备 　　按处方量制备不含葛根药材的阴性样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μl,注入液相色谱仪中,按上述条件测定。结果表明,阴性对照溶液色谱图中与对照品位置处无干扰,此法可行(见图1)。 　　2.5 线性关系考察 精密吸取葛根素对照品溶液4、8、12、16、20 μl,分别注入高效液相色谱仪中进行分析。以对照品进样量(μg)为横坐标,以对照品的峰面积为纵坐标作图,得一条通过原点的直线,回归方程为：y＝2 490 376.534x＋19 847.951,r＝0.999 6。结果表明,葛根素在0.114～0.570 μg间呈良好的线性关系。 　　2.6 精密度试验 　　精密吸取供试品溶液连续5次重复进样,测得相对偏差rsd＝0.53%。 　　2.7 稳定性试验 精密吸取供试品溶液在0、2、4、8 h分别进样,结果葛根素峰面积的rsd＝0.24%,表明在8 h内供试品溶液的葛根素含量稳定。 　　2.8 重现性试验 精密称取同一批号样品5份,按供试品溶液的制备方法制备,依法进样分析,样品中葛根素含量的rsd＝1.05%,表明其重现性良好。 　　2.9 加样回收率试验 精密称取葛根素对照品适量,加入已测葛根素含量的降脂减肥颗粒样品(取约1.0 g,精密称定)中,置具塞锥形瓶中,精密加30%乙醇100 ml,按供试品溶液的制备方法制备,进样,测定,计算回收率。结果见表1。表1 回收率试验测定结果（略） 　　2.10 含量测定 按上述方法制备供试品溶液,测定3批降脂减肥颗粒中葛根素的含量,结果见表2。表2 降脂减肥颗粒中葛根素含量测定结果(略) 　　3 讨论 根据葛根素的溶解性,分别以乙醇、30%乙醇为提取溶媒进行试验,结果表明,以30%乙醇提取制备供试品溶液能使葛根素提取完全,以甲醇为溶媒制备的溶液中杂质峰较少,含量偏低,故选择以30%乙醇为溶媒制备供试品溶液。 　　有关葛根素的高效液相色谱法含量测定方法较多,流动相有采用乙腈、甲醇、水、冰醋酸等系统[2]。我们采用甲醇、水系统,色谱分离效果较为满意,分离度及峰形对称性较好。 【