鼠疫菌重要调控子蛋白的表达纯化及DNA结合活性分析.pdfVIP

???? 生? 物? 技? 术? 通? 讯? ????．????????????????????? ???．?????．?????．，????? ???：??．?????．????．?????????．????．??．???? 研 究 报 告? 鼠疫菌重要调控 子蛋 白的表达纯化及 ???结合活性分析? 罗 张?，高鹤?，张义全?，王丽?，谭 亚芳?，郭兆彪?，杨瑞馥?，周冬 生? ?．军事 医学科学院 微生物流行病研 究所 ???病原微生物生物安全国家重点 实验室 ，北京 ??????? ?．中国疾 病 预 防 控 制 中心 传 染病 预 防控 制 所 ，传 染 病 预 防控 制 国 家重 点 实验 室 ，北 京 ??????? ?摘 要 ?? 目的 ：利 用 大 肠 杆 菌 ??????????的表 达 系 统 ，表 达 ?个 有 活 性 的 、与 鼠疫 耶 尔森 菌 ?鼠疫 菌 ?传 播 及 致 病 密? 切 相 关 的调 控 子蛋 白，并 对 这 些 蛋 白与 ??? 的 结 合 活 性 进 行 分 析 ，为 构 建 鼠疫 菌 毒 力 基 因 转 录 调 控 网络 建 立分 子? 生 化 实验 平 台。方 法 ：通过 分 子 克 隆技 术构 建 鼠疫 菌 调 控 子 蛋 白的表 达 菌 株 ，所 得 菌 株 经 ????诱 导后 能分 别 表 达 鼠? 疫 菌 ???、???、????、????、????、????和 ???? 带 ???标 签 的 融合 蛋 白；对这 些 蛋 白与 ??? 的 结 合 基 序 进行 生 物? 信息学预测 ；通过体外凝胶迁移实验验证上述蛋 白与靶 ???的结合活性。结果 ：表达 了?种有活性的鼠疫菌调控子? 蛋 白，这 些 蛋 白与靶 基 因启 动 子 区具 有 体 外 结 合 活 性 。结 论 ：表 达 的 ?种 调 控 子 蛋 白在 鼠疫 菌 的传 播 致病 中有 重 要? 作用 ，这 些调控子蛋 白与 ???体外结合 实验平 台的建立，是构建鼠疫菌毒力基 因转录调控 网络 的基础。? 【关 键 词 ?? 鼠疫 耶 尔森 菌 ；调 控 蛋 白；??? 结合 活性? ?中图分 类号 ? ???；????? ?文献标识码? ?? ?文章编号?? ????—????????????—????—??