FoxO1在持续张应力促MC3T3-E1细胞成骨向分化中的表达变化.pdfVIP

医用生物力学第 30 卷第 2 期 2015 年 4 月 154 Journal of Medical 8iomechanics , Vol. 30 No. 2, Apr. 2015 文章编号 :1 ∞4-7220 ( 2015 )02-0 154-05 FoxOl 在持续张应力促 MC3T3-四细胞 成骨向分化中的表达变化 欧阳宁码，张鹏，傅润卿，王洁，房兵，江凌勇 (上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔颅顿面科，上海市口腔医学重点实验室，上海 2ω011 ) 摘要:目的 研究体外持续张应力对 MC3 T3 -El 细胞成骨向分化过程中 Forkhead 转录因子 1 (Forkhead box protein 01 , FoxOl)表达的影响，探讨 FoxOl 在持续张应力促进骨向分化机制中的作用。方法 MC3 T3 -El 细胞接种，应用 FX40∞TTM 细胞应力加载系统予以体外力学干预。施加频率 1 Hz 、幅度 10% 的张应力，按照加力时间长短分为对 照和 1 、4 、 6 、 12 、 24 、 48 、 72h 组。运用酶化学染色、实时荧光定量 PCR 、蛋白免疫印迹、细胞免疫荧光等方法观察持 续张应力对 MC3 T3 -El 成骨能力变化的影响及 FoxOl 基因、蛋白表达和细胞定位情况。结果 (1)持续张应力能 够促进 MC3 T3 -El 骨向分化。细胞碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase , ALP) 表达量在 24 、 48 h 显著高于对照组，骨钙 素( osteocalcin , OCN) 表达水平子 72h 达峰值并显著高于对照组，骨特异性转录因子 (runt-related transcription factor-2 , Runx2)表达量在 4 h 与对照组相比显著升高，其蛋白表达量也随加力时间而改变。加力组 ALP 染色结果 与对照组有显著差异。 (2) 持续张应力促进 FoxOl 的基因和蛋白表达。 FoxOl 基因表达水平 24 h 增高最明显， 其蛋白表达量于 12 h 显著上升。 (3 )加力 6 h FoxOl 胞核聚集，胞浆可见，但于 24 h 转位在胞浆大量表达。 结论 10% 持续张应力可以促进 MC3 T3-凹的成骨肉分化，同时 FoxOl基因和蛋白表达上调、蛋白定位改变。探寻 FoxOl 表达水平和定位情况在力学刺激下的变化规律，可为研究其在力学刺激中发挥的作用提供实验基础。 关键词: Forkhead 转录因子 1 ;持续张应力;骨向分化;成骨细胞 中图分类号: R 318.01 文献标志码 :A DOI: 10. 38711j. 1 ∞4 刁 220.2015.02.154 Changes in FoxOl expression of MC3T3-El cells during continuous tensile stress-induced osteogenic differentiation OUYANG Ning-juan , ZHANG Peng