PCR-RFLP和PCR-SSCP技术对常见食源性感染致病菌23S rDNA基因的鉴定.pdfVIP

临床检验杂志 年第 卷第 期 ， ， ， ·论著· 文章编号： （ ） 中图分类： 文献标识码： 和 技 术 对 常 见 食 源 性 感 染 致 病 菌 基因的鉴定 ， 洪帮兴 ，江丽芳 ，胡玉山 ，方丹云 ，晏辉钧 ，侯红斌（ 中山大学医学院微生物学教研室，广州 ； 广东省 深圳市福田疾病预防控制中心） 摘要：目的 探讨应用 和 进行食源性感染常见致病菌鉴定的可行性。方法 选择细菌 基因 作为靶基因，设计合适的通用引物进行 扩增，对 种食源性感染常见致病菌扩增产物的酶切片段进行 和 分 析。结果 通用引物??以扩增出 种食源性感染常见致病菌的 基因，!#!酶切产物的 分析表明，不同种 属的致病菌表现出不同的 图谱； 分析表明， 种食源性感染常见致病菌 图谱变异性更大，不利于种属间鉴 别，但有利于种内的鉴定。结论 运用 和 可以进行食源性感染常见致病菌的鉴定诊断。 关键词： ；限制性片段长度多态性；单链构像多态性；聚合酶链反应；食源性感染 细菌的保守基因常被选作细菌鉴别诊断的靶基 基因片段，应用 和 因， 和 基因是细菌相对保守的 进行食源性感染常见致病菌的鉴定，并探讨在致病 基因， 更为保守，常用于细菌的分类，但 菌亚种和血清型水平鉴别的可行性。 仍难对科内各属细菌进行鉴定。 的变异 ! 材料和方法 性高于 ，在许多细菌的属、种、亚种甚至 ! ! 菌株的选择与培养 标准菌株选取引起食源 血清型、株等分类层次上都有不同程度的变异性，常 性感染的 种（属）常见致病菌，见表 。以上菌株 用于细菌在较低分类层次上的鉴别诊断和流行病学 均为本室保存的标准菌株。将菌株复苏后接种于相 ［ ］ 亲缘关系追踪 ，如果检测位置选择恰当，不但可 应的增菌培养基培养 后转种至相应的选择培养 以对各属细菌进行鉴定，还可以在种、亚种甚至血清 基培养 。 型、株等分类层次上进行鉴定。本文旨在探讨选取 表 菌株及扩增片段 !#!酶切分析一览表 菌株号 菌株名称 注册号 !#!酶位点数 酶切片段大小（ ） 大肠埃希菌 ， ， ， ， ， ， ， 肠炎沙门菌 ， ， ， ， ， ， ， 志贺菌属 ， ， ， ， ， ， ， 金黄色葡萄球菌