血管内皮生长的因子VEGF与肿瘤负荷相关性研究.doc

文章来源：《名医》杂志 2616年第6期 血管内皮生长因子VEGF与肿瘤负荷相关性研究 1 贾晓辉 2郝丽丽 1吉林市第二人民医院 2 吉林市肿瘤医院 摘要：目的 通过对VEGF检测数据的分析为所有癌症风险的早期预警提供更加广谱的分析依据，并且能够为癌症高发人群提供动态监测，在提供预警的同时，使癌症相关人群远离担忧和恐惧。方法VEGF标准品为冻干粉，使用前将待检样品与样品稀释液1:1稀释，将所有试剂充分混匀，避免产生泡沫，根据试验孔数量，确定所需板条数目，配液，加样，洗涤，加酶，用封板膜封板后置37℃避光温育60min，然后洗涤、显色，测定，最后依据标准品各测量值与浓度绘制出标准曲线，然后根据样品的吸光值找出对应的浓度。结果 VEGF在肿瘤患者较非肿瘤患者表达性高，在肿瘤活动期较稳定期表达性高。结论：此技术在国内属于新开展的检测项目，更加精确的判定肿瘤患者体内肿瘤负荷情况，推动医学养生、诊断、治疗等监测技术的进步，为人类健康做出贡献。 关键词 肿瘤 血管内皮生长因子VEGF 我国癌症发病率接近世界水平，但死亡率高于世界水平，全国每年新发肿瘤病例估计约为312万例，癌症死亡的几率是13%，即每7-8人中就有1人因癌症死亡，那么怎么能降低死亡率成了我们首要面临的问题。对于高危人群进行肿瘤筛查，提前发现、诊断、治疗可有效降低癌症引起的死亡率。肿瘤的生长依赖于新生血管，肿瘤进展分血管前期和血管期两个阶段，直径2mm以下的瘤体为血管前期，一般对健康没有影响，一旦新生血管长入瘤体内，并且建立肿瘤自身的微循环时，肿瘤即获得血供，进入血管期，迅速生长，其恶性特征也随之表现出来，肿瘤血管蔓延程度，与肿瘤病灶的生长正相关。在血管新生蔓延过程中，必须有VEGF的参与。VEGF的一个重要功能是刺激血管内皮细胞增殖、迁移，并形成新生血管，新生的肿瘤血管不仅是肿瘤细胞增殖所必须的内部条件，也是肿瘤转移的第一路径。VEGF的浓度会随着癌症发生、发展的变化趋势而出现明显的数据变化，给医生还有患者很直白的动态变化指示，它不会因为某个独立的癌症病灶消失而消失，只要身体里面还有癌症，VEGF就能检测到，因此说，通过VEGF检测，可以更早的透视癌症病情的变化，将癌症复发、转移的风险预警做到最好。 研究内容与方法 研究内容：病例来源于吉林市第二人民医院自2014年6月至2015年12月所有门诊及住院肿瘤患者500例，观察其VEGF与肿瘤负荷相关性研究 1.2方法：从2-8℃取出试剂盒，室温放置（22℃）20-30min使其回到室温再开始检测。VEGF标准品为冻干粉。先按标签说明将冻干粉用1ml样品稀释液溶解，充分溶解后母液浓度为800pg/ml。再用样品稀释液进行倍比稀释。稀释前将标准品轻轻振荡2min。稀释冻干品时取液一定要准确，倍比稀释从高浓度到低浓度时注意要更换枪头。根据实验孔（血清样品和标准品）数量，确定所需的板条数目，剩余不用的用自封袋密封放置4℃保存。配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释（例：50ml浓缩洗液加入到950ml蒸馏水中）。加样：分别在相应孔中加入相应浓度的标准品200ul/孔，待检孔先加入样品稀释液100ul再加入待检的血清样品100ul(血清样品加入前要混匀)，轻轻振荡混匀，盖上封板膜，放置于37℃恒温箱温育60分钟。洗涤：扣去孔内液体，380μl/孔加入稀释后的洗涤液；停留15秒后弃去孔内液体并在滤纸上扣干。重复5次。加酶：每孔加入酶标抗体工作液200μl。温育：用封板膜封板后置于37℃恒温箱避光温育60分钟。洗涤：扣去孔内液体，380μl/孔加入稀释后的洗涤液；停留1分钟后弃去孔内液体并在滤纸上扣干。重复5次。显色：每孔加入显色剂A、B液各100μl，轻轻振荡混匀，封板后放置于37℃恒温箱避光显色10分钟。测定：每孔加终止液50μl，轻轻振荡混匀，放入酶标仪用双波长450/630nm测定各孔OD值。 1.3结果判定：依据标准品各测量值与浓度绘制出标准曲线，然后根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。患者真实VEGF浓度=2×求算各孔VEGF浓度值（由于前面血清是1:1稀释，所以，结果要乘以2）。 参考曲线： 1.4 VEGF的影响因素： 类风湿性关节炎、糖尿病视网膜病、银屑病、心肌梗死及其它心脏疾病、血管炎、风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、结节病、慢性肾炎、肾血管疾病、子宫肌瘤等疾病也会使血清VEGF升高。 正常人创伤、女性月经期、溶血、黄疸、血脂高者VEGF均可升高。 2.结果 2.1、VEGF正常参考范围为0-142.2pg/ml 检测结果80pg/ml 目前无肿瘤风险，处于安全期间，建议半年内复检。 检测结果在80-142.2pg/