近红外光谱技术在小麦条锈病菌和叶锈病菌定性识别和定量测定中的应用_李小龙_马占鸿.pdfVIP

第 ３ 　 ４ 卷，第 ３ 期 　 　　　　　　　　　　　 光 谱 学 与 光 谱 分 析 Ｖｏｌ．３４ ， Ｎｏ．３ ， ｐｐ ６４３ － ６４７ ２ 　 ０ 　 １ 　 ４ 年 ３ 月 　　　　　　　　　　　 　 Ｓ ｐ ｅｃｔｒｏｓｃｏ ｐｙ 　 ａｎｄ 　 Ｓ ｐ ｅｃｔｒａｌ 　 Ａｎａｌ ｙ ｓｉｓ 　 Ｍａｒｃｈ ， ２０１４ 　 近红外光谱技术在小麦条锈病菌和 叶锈病菌定性识别和定量测定中的应用 李小龙１，马占鸿１，赵龙莲２，李军会２，王海光１＊ １． 中国农业大学农学与生物技术学院，北京 　 １００１９３ ２． 中国农业大学信息与电气工程学院，北京 　 １０００８３ 摘 　 要 　 利用近红外光谱技术结合定性偏最小二乘法（ ＤＰＬＳ ）和定量偏最小二乘法（ ＱＰＬＳ ）分别实现了 小 麦 条锈病菌和叶锈病菌的定性识别和定 量 测 定。获 取 两 种 锈 菌 单 一 夏 孢 子 样 品 各 ５０ 个 以 及 条 锈 病 菌 纯 度 为 ２．５％ ～ １００％ 的混合样品 １２０ 个。采集样品光谱后，将两类样品均按 ２∶１ 的比 例 分 为 建 模 集 和 检 验 集，在 ４ 　 ０００ ～ １０ 　 ０００ｃｍ －１内采用内部交叉验证法建模。散射校正预处理方法下、主成分数为 ３ 时，定性识别模型 的 建模集和检验集识别准确率均为 １００．００％ 。“极差归一 ＋ 散射校正”预处理方法下、主成分数为 ６ 时，定量 测定模型建 模 集 的 决 定 系 数（ Ｒ ２ ）、校 正 标 准 差（ ＳＥＣ ）、平 均 相 对 误 差（ ＡＡＲＤ ）分 别 为 ９９．３６％ ， ２．３１％ ， ８．９４％ ，检验集的 Ｒ ２ 、预测标准差（ ＳＥＰ ）、 ＡＡＲＤ 分别为 ９９．３７％ ， ２．２９％ ， ５．４０％ 。结果表明，利用该方法 对这两种锈菌定性和定量分析是可行的。本研究为植物病原菌的定性识别 和 定 量 分 析 提 供 了 一 种 基 于 近 红 外光谱技术的新方法。 关键词 　 近红外光谱；小麦条锈病菌；小麦叶锈病菌；定性识别；定量测定 中图分类号： Ｏ６５７．３ ； Ｓ４３１．９ 　　 文献标识码： Ａ 　　　 ＤＯＩ ： １０．３９６４ ／ ｊ ．ｉｓｓｎ．１０００ － ０５９３ （ ２０１４ ） ０３ － ０６４３ － ０５ 　 收稿日期： ２０１３ － ０５ － １５ ，修订日期： ２０１３ － ０９ － ０３ 　 基金项目：国家科技支撑计划项目（ ２０１２ＢＡＤ１９Ｂ０４ ）资助 　 作者简介：李小龙， １９８８ 年生，中国农业大学农学与生物技术学院硕士研究生 　　 ｅ － ｍａｉｌ ： ｇ ｏｏｄ ＿ ６０１７ ＠ １２６．ｃｏｍ ＊ 通讯联系人 　　 ｅ － ｍａｉｌ ： ｗａｎ ｇ ｈａｉ ｇ ｕａｎ ｇ＠ ｃａｕ．ｅｄｕ．ｃｎ 引 　 言 　　 由 Ｐｕｃｃｉｎｉａ 　 ｓｔｒｉｉ ｆ ｏｒｍｉｓ 　 ｆ．ｓ ｐ ．ｔｒｉｔｉｃｉ 引起的小麦条锈病 和由 Ｐ．ｒｅｃｏｎｄｉｔａｆ．ｓ ｐ ．ｔｒｉｔｉｃｉ 引起 的 小 麦 叶 锈 病 发 生 范 围 广、流行性强、危害性大，是 长 期 影 响 中 国 小 麦 安 全 生 产 的 两种重要病 害［１］。小 麦 条 锈 病 和 叶 锈 病 均 为 气 传 多 循 环 病 害，病原菌主要以夏孢子形式借助气流传播完成周年侵染循 环，田间菌量关乎这两种病害能否发生流行及流行的严重程 度［１］。田间这两种病原菌的定性识别和定量测定对于这两种 病害的预测预报具有重要意义。利用病原菌监测结果分别对 这两种病害进行早期预警，可以及时 制 定 防 治 策 略、对 症 下 药，最大限度地减少病害造成的损失。 一般利用孢子捕捉法实现田间气传病原菌量的监测。然 而，利用孢子捕捉器不可避免的会收集到小麦条锈病菌和叶 锈病菌的混合孢子，混合状态下难以区分病原种类和进行病 原定量估计。一般地，这两种小麦锈菌 的 识 别 主 要 是 利 用 室 内接种 鉴 定［１］、盐 酸 处 理 后 形 态 观 察［２］、分 子 生 物 学 方 法［３－５］等进行。小麦 苗 期 发 生 条 锈 病 和 叶 锈 病 时，这 两 种 病 害症状容易混淆，难以准确鉴别。小麦 条 锈 病 菌 和 叶 锈 病 菌 的夏孢子经盐酸处理后形态和原生质体发生变化，依此可对 这两种锈菌进行种类鉴别，但是夏孢 子 活 力、盐 酸 浓 度 等 对 鉴别结果有很大影响，为保证鉴别结 果 的 准 确 性，需 要 结 合 分子生物学方法等进行综合判断。分子生物学方法可准确实 现这两种锈菌的种类鉴定，但过程繁 琐，仪 器 和 技 术 要 求 比 较高，目前难以在生产 上 推 广 普 及。并 且，小 麦 条 锈 病 菌