Fn、HSP70在冠心病猝死心肌中表达的诊断意义.docVIP

　　Fn、HSP70在冠心病猝死心肌中表达的诊断意义 作者：孙忠国 张凡 成日青 张九鸿 【摘要】 目的： 探讨冠心病猝死心肌组织Fn、HSP70染色改变，为法医学鉴定冠心病猝死提供客观依据。 方法 ： 选择35例冠心病猝死案例、30例冠心病死亡案例以及32例非冠心病死亡案例，用免疫组化方法对比检测纤维连接蛋白（Fibronectin Fn）和热休克蛋白70（heat shock protEin70 HSP70）的表达。结果： 纤维连接蛋白在35例冠心病猝死案例、冠心病死亡案例以及非冠心病死亡案例中均有不同程度的阳性表达，且冠心病组的表达水平明显高于冠心病猝死组和非冠心病死亡组（Plt;0.05）；冠心病猝死组的表达水平明显高于非冠心病死亡组（Plt;0.05）；HSP70在冠心病猝死案例、冠心病死亡案例组呈阳性表达，冠心病组表达水平明显高于冠心病猝死组（Plt;0.05），非冠心病死亡组均呈阴性表达；Fn在冠心病猝死组中的表达与HSP70呈明显正相关（Plt;0.05）。结论： 纤维连接蛋白和HSP70的阳性表达是心肌缺血和损伤的灵敏指标，对推断冠心病猝死具有一定的实际 应用 价值。 【关键词】 冠心病猝死；纤维连接蛋白；热休克蛋白70；免疫组织化学 【ABSTRACT】 Objective: To investigate the change of Fn HSP70s expressions in sudden coronary death and search for reasonable basis for forensic pathology to diagnose sudden coronary death.Methods: The expressions of Fn、HSP70 proteins mmunohistochemistry method in thirtyfive cases died of sudden coronary death、thirty cases died of coronary heart disease and thirtytong nosudden coronary death（Plt;0.05）;the expression level of sudden coronary death is higher than that of nosudden coronary death（Plt;0.05）;HSP70 have positive expresssion only in sudden coronary death and coronary heart disease The expression of HSP70 in coronary heart disease is higher than that of sudden coronary death. There is positive correlation betyocardiums injury and anemic so they have practical value for forensic pathology to diagnose sudden heart death. 【KEY 2；Fn抗体购自福建迈新试剂公司，单克隆抗体，二抗、三抗为SP复合物和山羊抗兔PV6001，购自北京中山试剂公司，按说明书严格进行操作，用试剂公司提供阳性片作阳性对照，以PBS代替一抗作阴性对照。 1.3 主要免疫组化步骤 二甲苯脱蜡、梯度酒精至水，3%双氧水灭活内源性过氧化酶，PBS缓冲液振洗，正常山羊血清封闭、一抗冰箱过夜，二抗 、三抗各1h DAB显色10～15min，复染核脱水透明，中性树胶封片。 1.4 阳性表达图象 分析 采用HIPAS100图象分析软件对所有切片进行图象分析，每张切片随机选取5个着色典型区域且不重复的视场，测量每个视场中阳性单位，取其均数即为该切片的表达水平，所有的结果都以均数±标准差表示。 1.5 统计学方法 应用SPSS10.0统计软件进行统计学处理。不同组间表达率的比较采用Fisher精确概率法，各指标表达水平比较用t检验。 2 结果 2.1 HE染色观察 冠心病死亡组心肌细胞颗粒变性，出现收缩带，心肌细胞坏死纤维化，急性心肌梗死者，可见局部出血或淋巴细胞、中性粒细胞浸润，陈旧性梗死纤维瘢痕形成。冠心病猝死组心肌肥大变性，嗜伊红性强，细胞浆聚集呈颗粒状或细胞浆溶解呈空泡化，细胞核增大，染色质疏松。非冠心病猝死组Ⅴ型1例，Ⅵ型1例出现心肌细胞颗粒变性和陈旧性梗死纤维瘢痕形成外，其余病理变化同冠心病猝死组无明显组织学区别。 2.2 纤维