原创力文档- 1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
- 2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击 这里二次下载。
- 3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
- 4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
- 5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
- 6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
- 7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次， 网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档
查看更多
透射电镜样品制备-生物技术
透射电镜生物样品制备技术;
1．超微结构保存良好，无明显的物质凝聚、丢失或添加等人工假象。
2．超薄，一般500?左右。
3．有良好的反差。
4．切片均匀，无皱褶、刀痕、震颤痕及染色剂沉淀。;操作的基本环节：;【1】原则：
（1）新鲜。（材料离体后一分钟内进入固定液）
（2）体积小。（ 1mm3，特别是厚度1mm）
（3）机械损伤小。（动作轻巧，器械锋利）
（4）低温操作。（降低酶的活性，减少组织自溶）
（5）取材部位准确。（局限性 光镜配合 多点取材
做好标记） ;[2]方法：;（2）体外培养细胞的取材：;【1】固定液的组成：
固定剂：蛋白质交联成凝胶，使核酸、糖类、脂类变为不溶性
缓冲剂：维持恒定PH值
附加剂：维持适当渗透压，避免肿胀、皱缩，避免析出、沉淀;【2】常用固定剂的特点;（2）锇酸（又称四氧化锇。OSO4, ）;多聚甲醛（Paraformaldehyde）：对细胞精细结构的保存不如戊二醛，但在酶活性的保存上却优于戊二醛，一般多用于组织化学或快速固定。
高锰酸钾 ：对脂蛋白膜有良好的固定作用 。;【3】戊二醛、锇酸双固定操作程序：;3、水洗与脱水：;4．浸透与包埋： 是将组织块制成能进行超薄切片的硬块。;（2）包埋液的组成：;（3）浸透、包埋具体步骤：;;（4）包埋操作中的注意事项：;5．超薄切片;2）支持膜;（解剖镜下） 修块的目的： 暴露组织， 使切片形成理想的切片带， 便于下步定位精修。;4)制作玻璃刀：制刀 安水槽 封固 ;;半薄切片定位： ;（2）超薄切片： ;6．超薄切片染色（正染）;6．超薄切片染色（正染）;避免生成沉淀，注意：;良好固定的形态学标准：;步骤;二、负染色技术（阴性反差染色）;良好负染剂的条件：;优点：反差强，分辨力高（可达15?左右）
快速、简单易行
染色本身不改变生物样品的活性，
不造成样品变形。
缺点：染色效果不很稳定，
有时在相同条件下染色的结果不一致。;八、电镜细胞化学技术（电镜组织化学）;（一）一般原理;（二）制样的基本要求;（三）对照;九、免疫电子显微镜???术 ;非标记直接观察法;（一）免疫铁蛋白技术 ;;（二）免疫胶体金技术 ;免疫胶体金
文档评论（0）