HPLC法测定复方奥硝唑大黄口腔膜中大黄素含量.docVIP

　　HPLC法测定复方奥硝唑大黄口腔膜中大黄素含量 作者：王晋楠，邵长江，贺殿，贾忠 【摘要】 目的 建立用高效液相色谱（HPLC） 法测定复方奥硝唑大黄口腔膜中大黄素的含量。 方法 采用HPLC法, 色谱柱为Agilent ZORBAXSB- C18（4.6mm×150mm, 5μm）, 流动相为甲醇-0.1%磷酸水溶液（4：1）, 流速为1.0ml/min, 柱温为30℃, 检测波长为254nm。结果 大黄素在0.04～0.4μg/ml（r = 0.9998） 范围内线性关系良好。大黄素平均回收率分别为98.25%。结论 该方法操作简便、快速、准确。 【关键词】 复方奥硝唑大黄口腔膜；大黄素；高效液相色谱法 【Abstract】 Objective To establish a method for the determination of emodin in pound ornidazole-rhubarb buccal film by HPLC.Methods A HPLC method n （150 mm ×4.6mm, 5μm）. The mobile phase ethanol- 0.1%phosphoric acid （4:1）.The floL/min. The column temperature . Results The calibration curve ethod is simple, rapid and accurate. 【Key ；emodin；HPLC 牙周炎是一种常见病、多发病，由厌氧菌感染引起，局部 应用 抗菌药物对于牙周病的 治疗 有很好的效果。以往报道的牙周炎药膜多以生物不降解的材料为辅料，使用中需要定时更换。复方奥硝唑大黄口腔膜由兰州大学药学院和兰州市第一人民 医院 口腔科合作开发作为医师协定处方，治疗牙周炎，疗效确切。它以奥硝唑为主药，大黄提取物中蒽醌类成分为辅药，具有活血化淤、消炎止痛、促进创面愈合等作用。该口腔膜剂是生物可吸收性牙周炎药膜，应用时不需要更换药膜，可被机体有效吸收，达到长效和加强愈合的作用［1，2］。为有效地控制该口腔膜剂的内在质量，确保临床疗效，本文报道采用反相高效液相色谱法测定大黄素含量。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Agilent-1100 高效液相色谱仪, G1315A/BDAD检测器, G1313ALS自动进样器, Agilent-1100色谱工作站（美国安捷伦 科技 有限公司）；BS224型 电子 天平（德国赛多利斯公司）；KQ5200DB型数控超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司）；0.45μm滤膜（天津Do-Chrom科技有限公司）；台式离心机（上海安亭 科学 仪器厂，型号TDL-40B）；SZ- 97自动三重纯水蒸馏器（上海科析亚荣生化仪器厂）；DZKC-Na，分别加适量蒸馏水浸泡12h，使其充分溶胀。再将PVA和CMC-Na分别置85℃～95℃水浴上加热溶解后混合，过滤备用。按处方量称取奥硝唑溶于热蒸馏水中，称取大黄提取物溶于90%乙醇中，并将它们加入备用的成膜材料浆液中，加入甜蜜素、甘油，适量水至规定量，搅拌均匀后，于超声仪中超声30min脱泡后，倾入预先涂有少量液体石蜡的玻璃板上，于净化室内铺膜，避光，50℃～60℃干燥，启膜，在紫外灯下照射15min 灭菌，在净化台上分割成1cm×0.5cm药膜（每片含大黄提取物约50mg，奥硝唑约1mg），密封包装 （烫封于聚乙烯薄膜中）。 2 方法与结果 2.1 色谱条件色谱柱 Agilent ZORBAXSB-C18（4.6mm×150mm, 5μm）, 流动相: 甲醇- 0.1%磷酸水溶液（4：1）；流速: 1.0ml/min； 柱温: 30℃； 检测波长: 254nm，进样量10μl。 2.2 试验溶液的制备 2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取大黄素对照品各5mg分别于两个50ml量瓶中, 加甲醇溶解制成0.1mg/ml大黄素储备液, 各取上述溶液2ml于10ml量瓶中, 加甲醇定容, 即得含大黄素（20mg/L）对照品溶液。 2.2.2 样品溶液的制备 取复方奥硝唑大黄口腔膜10cm2 （含大黄酚9.49mg），剪碎，置50ml容量瓶，加甲醇定容至刻度，超声30min使膜完全溶解，取上清液10ml于离心管中，以4000r/min 离心10min，取上清液5ml，置烧瓶中, 挥去甲醇, 加2.5mol/L的硫酸溶液10ml, 超声5min, 加氯仿10ml, 置水浴中加热回流水解1h, 冷却, 转移至分液漏斗中, 烧瓶用少量氯仿润洗3次, 用氯仿振摇萃取3次, 每次10ml, 合并氯仿液, 用无水硫酸钠脱水, 减压蒸馏挥去氯仿, 残渣用