RPHPLC法测定轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的含量.docVIP

　　RPHPLC法测定轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的含量 【摘要】 目的 建立轻身消胖丸中盐酸麻黄碱的定量 方法 。方法 采用RPHPLC法，色谱柱：ethods The sample m×250 mm, 5 μm) column using 1%H3PO4（0.4% triethylamine）acetonirile(91∶9) as mobile phase. The detection . Results The average recovery of the method L. Conclusion This method is simple, quick, reproducible and suitable for the quality control of Qingshenxiaopang pills. 　　Key pom×250 mm,5 μm)；1%磷酸溶液(含0.4% 三乙胺)乙腈(体积比91∶9)；流速：1.0 mL/ min；检测波长：207 nm；柱温：35 ℃。 　　2.2 溶液的制备 　　2.2.1 对照品溶液的制备精密称取盐酸麻黄碱对照品适量，加水制成含盐酸麻黄碱0.3320 mg/mL。 　　2.2.2 供试品溶液的制备精密称取本品10 g，加水60 mL使溶解，加氨水7.5 mL，摇匀，用三氯甲烷充分振摇萃取5次，每次20 mL，合并三氯甲烷液置于圆底烧瓶中，室温减压旋转至干［4］，加流动相溶解并定容至10 mL，密塞，超声使其溶解，0.45 μm滤膜滤过，即得。 　　2.2.3 阴性样品溶液除不含麻黄外，其余按处方比例制备缺麻黄的样品，按“2.2.2”项下方法制备阴性样品溶液。 　　2.2.4 药材对照液取麻黄药材按“2.2.2”项下方法制备，作为药材对照液。 　　2.3 线性关系精密称取盐酸麻黄碱16.60 mg，至50 mL量瓶中，加流动相溶解至刻度，摇匀，得约0.332 0 mg/mL盐酸麻黄碱对照品储备液。精密吸取上述对照品储备液1、2、4、6、8、10 mL分别置20 mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，混匀后，分别进样10 μL，记录色谱图。以色谱峰面积(A)为纵坐标，对照品质量浓度（ρ）为横坐标，进行线性回归，回归方程为A=21 523ρ+21 310，r=0.999 7，盐酸麻黄碱在166～166 μg/mL范围内呈良好线性。 　　2.4 阴性试验按上述色谱条件，分别取对照品溶液、供试品溶液、药材对照液和阴性样品溶液各20 μL，分别注入高效液相色谱仪，结果供试品色谱中，盐酸麻黄碱与其他色谱峰分离较好，阴性样品溶液在盐酸麻黄碱的保留时间范围内无干扰峰出现，而麻黄药材和轻身消胖丸样品中均含有盐酸麻黄碱峰，说明盐酸麻黄碱来源于麻黄药材中。见图1。 　　A.盐酸麻黄碱对照品; B.麻黄阴性空白; C.轻身消胖丸供试品; D.麻黄药材 　　图1 轻身消胖丸的HPLC色谱图（略） 　　Fig.1 Chromatograms of Qingshenxiaopang pills 　　2.5 精密度试验 取供试品(批溶液，重复进样6次，每次20 μL，测定峰面积值分别为1 451 487、1 443 701、1 440 687、1 468 314、1 468 913，1 454 920,结果RSD为0.83%。 　　2.6 重复性试验取同一批样品（批，按“2.2.2”项下 方法 配制6份供试品溶液，分别测定盐酸麻黄碱含量，结果平均含量为33.92 mg/g，其RSD为10%。 　　2.7 稳定性试验取同一供试品（批溶液分别于0、2、4、6、8、12、24 h进样，分别测定麻黄碱的峰面积，结果其RSD为15%。表明供试品溶液在24 h内稳定。 　　2.8 回收率试验 精密称取10 g已知盐酸麻黄碱含量（33.88 mg/g)的同一批样品6份，精密加入一定量盐酸麻黄碱对照品，按“2.2.2”项下方法制备，测定其含量，并 计算 回收率，测定结果见表1。 　　2.9 含量测定　　分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入高效液相色谱仪,以上述色谱条件进行测定，按外标法以峰面积计算样品的含量。共测定3批样品,结果3个批20061210样品所测得的盐酸麻黄碱含量分别为33.88、33.62、34.17 μg/g。 　　表1 盐酸麻黄碱的加样回收率试验结果（略） 　　Tab.1 Results of recovery(n=6) 　　3 讨论 　　3.1 检测波长的选择取盐酸麻黄碱对照品适量，加流动相溶解后，经200～400 nm紫外扫描，结果表明在207 nm 处有最大吸收