HPLC法测定左卡尼汀注射液含量及有关物质.docVIP

　　HPLC法测定左卡尼汀注射液含量及有关物质 作者：闵翠娥，陆媛，江少仪，谭胜连 【摘要】 目的 建立测定左卡尼汀注射液含量及有关物质的方法。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱：MCPack NH2色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm);流动相：0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液乙腈(体积比35∶65)，磷酸调节pH至4.3;检测波长：205 nm;流速：1 mL·min-1;柱温：30 ℃。结果 左卡尼汀在1.04～8.30 mg·mL-1质量浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系，r=0.999 9;高、中、低3种浓度的平均回收率为100.7%，RSD为1.4%。左卡尼汀的检测限为3 ng，有关物质(E)4(三甲基氨基)2丁烯酯或(Z)4(三甲基氨基)2丁烯酯的检测限为0.02 ng。结论 该法简便、准确、灵敏度高，重现性好，适用于左卡尼汀注射液的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法;左卡尼汀;注射液;有关物质;质量控制 　Abstract:Objective To establish a HPLC method for the determination of levocarnitine Injection and its related substances.Method The HPLC m×4.6 mm,5μm) column L·min-1 at column temperature 30 ℃，of obile phase ol·L-1 solution of phosphate buffer and acetonitrile (35∶65,pH4.3) and the detected UV . Results The calibration curve g·mL-1 for levocarnitine,and the average recovery it of detection purity A. Conclusion It is an accurate,simple,rapid,qualitative method ination of levocarnitine and its related substances. 　　Key inopropylmethylsilyl silica gel)，在国内尚未找到相应的色谱柱。本文在欧洲药典[4]、英国药典[5]左卡尼汀原料有关物质测定方法的基础上，结合美国药典[3]左卡尼汀注射液的含量测定方法，建立了左卡尼汀注射液含量及有关物质的测定方法。 　 　1 仪器与试药 　　日本岛津LC10A高效液相色谱仪(LC10AT泵、SPD10A紫外可见检测器、CTO10A柱温箱、Hetler Toledo AG135 电子 天平。 　　左卡尼汀对照品(USP，批号：1359903，质量分数100%)、杂质A对照品(EP，批号：BP907F67029，质量分数100%)。左卡尼汀注射液分别由本公司(规格：5 mL∶1.0 g，批号：080301、080302、080303)和意大利SigmaTau公司(规格：5 mL∶1.0 g，批号：070864)提供。乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯，水为超纯水。 　 　2 方法与结果 　　2.1 溶液的制备 　　2.1.1 供试品溶液的制备 精密量取本品适量,加流动相制成每1 mL中约含左卡尼汀5 mg的溶液，即得。 　　2.1.2 对照品溶液的制备 精密称取左卡尼汀对照品适量，加流动相制成每1 mL中约含有左卡尼汀5 mg的溶液，即得。 　　2.2 色谱条件及系统适用性试验 　　色谱柱：YMCPack NH2 柱(4.6 mm×150 mm，5μm);流动相：0.05 mol·L-1磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾6.81 g,加水溶解并稀释至1 000 mL，摇匀)乙腈(体积比35∶65)，磷酸调节pH值至4.3;流速：1 mL·min-1;柱温：30 ℃;检测波长：205 nm;进样量：20 μL。分别取左卡尼汀对照品、杂质A对照品适量，加流动相配制成含左卡尼汀5 mg·mL-1、杂质A 0.025 mg·mL-1的溶液，取20 μL，进样，记录色谱图。理论塔板数按左卡尼汀峰 计算 为804 9，拖尾因子1.12，左卡尼汀与杂质A分离度为2.6。见图1。 　　2.3 专属性试验 　　分别取空白辅料溶液及“2.1”项下的供试品溶液、对照品溶液各20 μL，进样，结果表明空白辅料不干扰左卡尼汀含量测定。见图2。 　　2.4 破坏试验 　　2.4.1 酸破坏 精密量取本品1 mL，置20 mL容量瓶中，加1 mol·L-1的盐酸溶液2 mL，放置2 h，用1 mol·L-1的