RP－HPLC法测定健肝灵胶囊中丹酚酸B含量.docVIP

　　RP－HPLC法测定健肝灵胶囊中丹酚酸B含量 【摘要】 建立高效液相色谱法测定健肝灵胶囊中丹酚酸B含量的 方法 。方法 色谱柱：Ultimate XB-C18柱（5μm,4.6mm×250mm）；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；流动相：乙腈－甲醇－甲酸－水（10：30：1：59）；检测波长：286nm；进样量：10μl。结果 丹酚酸B在浓度为20.22～161.76μg/ml时线性关系良好，r=0.9999，平均回收率为100.86％；RSD为1.6％（n=6）。结论 该方法简单、准确，可作为健肝灵胶囊的质量控制。 【关键词】 高效液相色谱法 健肝灵胶囊 丹酚酸B 【Abstract】 Objective To establish a HPLC method for determination of salvianolic acid B in Jianganling capsules.Methods Ultimate XB-C18 column（5μm,4.6mm×250mm）obile phase consisted of acetonitrile－methanol－formic acid－l/min.The column temperature .Results A good linear range 20.22 to 161.76μg/ml （r=0.9999）. The average recovery rate ethod is simple and accurate. It can be used for the quality control of Jianganling capsules. 【Key ate XB-C18柱（5μm,4.6mm×250mm）；流速：1.0ml/min；柱温：25℃；流动相：乙腈－甲醇－甲酸－水（10：30：1：59）；检测波长：286nm；进样量：10μl。 2.2 对照品溶液制备 精密称取丹酚酸B对照品10.11mg，置50ml容量瓶中，用水溶解并定容至刻度，制成202.2μg/ml的贮备液。分别精密量取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ml，各置10ml量瓶中，加稀乙醇稀释至刻度，分别制成20.22、40.44、80.88、121.32、161.76μg/ml的溶液，即得。 2.3 供试品溶液制备 称取本品 内容 物约2.5g，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入水50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率400in，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液通过0.45μm的微孔滤膜作为供试品溶液。 2.4 线性范围 分别精密量取“2.2”项下的丹酚酸B对照品溶液各10μl注入高效液相色谱仪进行测定，测量峰面积。以对照品浓度（μg）为横坐标，峰面积为纵坐标，经线性回归。结果表明：丹酚酸B在20.22～161.76μg/ml范围内与峰面积线性关系良好。其回归方程为：Y=3.26+11.61X，r=0.9999。 2.5 干扰试验 将除丹参浸膏的其他几味药按处方所述 方法 制成阴性供试品，按“2.3”项下操作，制成阴性供试品液。在相同色谱条件下进样，色谱图见图1。 A.对照品 B. 供试品 C.不含丹参浸膏的阴性对照 图1 健肝灵胶囊的色谱图 2.6 精密度试验 精密量取上述对照品溶液（40.44μg/ml）10μl ，连续进样6次，记录峰面积，结果峰面积RSD=0.8%（n=6）。 2.7 稳定性试验 精密吸取同一样品溶液10μl，分别在0、3、6、9、12、18、24h进样，结果24h内峰面积RSD=1.4%（n=7）。结果表明，供试液待测组分在24h内稳定。 2.8 重复性试验 取同一批号样品6份，测定含量，结果表明，本方法重复性良好，丹酚酸B含量RSD=1.1％（n=6）。 2.9 加样回收率试验 取同批号样品6份，每份2.5g，分别加入丹酚酸B对照品适量，按“2.3”项操作，进样，测得回收率，结果见表1。表1 丹酚酸B加样回收率试验结果 2.10 样品测定 按“2.4”项下条件，分别测定3批健肝灵胶囊样品含量，结果见表2。 表2 样品含量测定 3 讨论 本方法采用高效液相色谱法测定样品中丹酚酸B的含量，方法简单、可靠，可作为健肝灵胶囊的质控指标之一。 参考