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中药多糖及其含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响.doc
中药多糖及其含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响
作者:罗燕,邵永斌,谷新利,赵宗胜
【摘要】 目的探讨中药复方多糖与各单味中药多糖及其含药血清对小鼠淋巴细胞增殖的影响。方法制备各中药多糖,并分离服用各多糖后的小鼠血清,分别加入到淋巴细胞悬液中,检测小鼠淋巴细胞增殖情况。结果各多糖组和含多糖血清组均能不同程度的促进淋巴细胞增殖,其中复方多糖和含复方多糖血清组最显著。结论血清药 理学 方法更能真实地反映药物的药理作用;各单味中药多糖对细胞免疫具有协同促进作用。
【关键词】 中药 糖 含药血清 淋巴细胞增殖
Abstract:ObjectiveTo discuss the effect of polysaccharides of traditional Chinese medicine and each single herbal polysaccharide and medicated serum on lymphocyte multiplication of mice.MethodsVarious polysaccharides of traditional Chinese medicines ouse serum phocyte respectively to examine lymphocyte multiplication.ResultsAll of the polysaccharides and medicated serum could increase lymphocyte multiplication,and the total polysaccharide of Chinese herbal recipe and its medicated serum ost remarkable.ConclusionThe serum pharmacology can reflect pharmacological action actually;single herb polysaccharide has the coordination action to the cellular immunity.
Key edicine; Polysaccharide; Medicated serum; Lymphocyte multiplication
自拟中药复方免疫增强剂由党参、黄芪、当归、熟地等11味中药配伍而成,经临床应用表明该复方对雏鸡有明显增重作用,能显著提高雏鸡成活率和饲料转化率;从该复方中提取的总多糖成分对小鼠免疫功能有显著促进作用[1,2]。本实验采用血清药理学方法,培养淋巴细胞,分别加入服用复方多糖和各单味中药多糖后的小鼠血清和各多糖水溶液,进行淋巴细胞体外增殖实验,初步探讨该复方多糖和11味单味中药多糖对机体细胞免疫功能的影响,以及复方多糖与各单味中药多糖之间的关系。
1 材料与仪器
1.1 动物昆明种小鼠,8~12周龄,体重18~25 g,雌雄兼用,购自石河子大学动物养殖中心。
1.2 试剂
MTT、RPMI-1640、标准胎牛血清均购自华美生物工程公司,台朌蓝购自北京拜尔迪生物公司。
1.3 仪器酶标仪(BIO-RAD),二氧化碳培养箱(Thermo Forma)。
1.4 药品实验用的中药复方免疫增强剂是由党参、黄芪、当归、熟地、淫羊藿、茯苓等11味中药配伍而成,各单味中药是从石河子医药公司同次购进,按照配伍比例称取各单味药混合后制成复方。中药复方多糖和各单味中药多糖由本院中兽医实验室提供。小鼠口服剂量均指经过换算实际进入小鼠体内纯多糖的含量,各多糖用时用蒸馏水配成0.05%的水溶液(5 mg/ml),115℃,30 min高压灭菌,备用。
2 方法
2.1 水煎剂的制备按照配伍比例称取各单味药混合后制成复方,将复方中药粉碎,充分混匀后称取复方中药7.0 g,加100 ml水煎煮,加热同时不时搅拌,水沸后计时40 min后用纱布过滤,收集滤液,在滤渣中重新加入60 ml水煎煮,水沸后计时30 min,再用纱布过滤弃渣,合并两次滤液,浓缩至140 ml,使每毫升水煎剂中含生药50 mg。
2.2 含药血清的制备[3,4]小鼠随机分为14组,每组10只,实验组分别灌服复方多糖、复方水煎剂以及当归多糖、川芎多糖、淫羊藿多糖、麦冬多糖、何首乌多糖、茯苓多糖、补骨脂多糖、熟地多糖、山楂多糖、党参多糖、黄芪多糖等11味单味中药多糖,对照组灌服生理盐水,每天灌服1次(每次0.5 ml/只),连续7 d,小鼠于末次灌胃后1 h摘除眼球取血,无菌分离血清,同组血清混合后经56℃、30 min灭活处理,再用0.45 μm微孔滤膜过滤除菌,置-20℃
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