人参不同部位超氧化物歧化酶活力比较.docVIP

人参不同部位超氧化物歧化酶活力比较.doc

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人参不同部位超氧化物歧化酶活力比较.doc

  人参不同部位超氧化物歧化酶活力比较 作者:李红艳,赵雨,杨士慧,张鑫,牛放,赵大庆 【摘要】 目的比较人参不同部位-芦头、主根及须根SOD活力,为探讨SOD在人参药材中的分布及人参各部位的临床应用提供依据。方法样品采用中性缓冲液4 ℃浸提24 h,采用改良的邻苯三酚自氧化法测定SOD活力,采用考马斯亮蓝法测定蛋白含量。结果人参芦头SOD活力为6.518 U/mg,主根SOD活力为5.232 U/mg,须根SOD活力为2.51 U/mg。结论人参SOD活力以芦头最高、主根次之,须根最低。 【关键词】 人参; 芦头; 主根; 须根; 超氧化物歧化酶   Abstract:ObjectiveTo pare the superoxide dismutase (SOD) activity of rhizome, taproot and fibrous root of Panax ginseng and to provide the basis of the SOD distribution, the quality evaluation in the different parts of Ginseng and clinical application. MethodsThe samples assie brilliant blue method ine the protEin concentration, and improved pyrogallol auto-oxidation method ine the SOD activity. ResultsThe SOD activitity of rhizome, taproo and fibrous root g, 5.232 U/mg and 2.51 U/mg, respectively. ConclusionThe SOD activity of different ginseng parts is different. The SOD activity in rhizome is the highest, taproot is folloe; Taproot; Fibrous root; SOD   SOD(Superoxide Dismutase, EC.1.15.1.1.,超氧化物歧化酶)是一种能清除生物体内产生的超氧阴离子自由基(O2-·)的金属蛋白酶类,其广泛存在于一切生物体内,能清除超氧阴离子使其生成过氧化氢,然后过氧化氢又被其他酶分解为水和氧气,从而减轻或消除超氧阴离子自由基对机体的损害[1]。该酶具有潜在药用价值,具有抗衰老、抗炎、抗辐射、祛斑、抗皱等多种药理作用[1,2],并且该酶还具有较高的催化活性和化学稳定性,因此可以被作为药剂学及临床研究的 参考 因素[3]。   人参为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Meyer.的干燥根。研究表明,人参具有抗衰老、抗氧化、增强机体免疫力等多种药理活性[4,5]。迄今已知人参根中含有人参皂苷、多糖、蛋白质等多种有效成分,但目前的研究大多针对人参皂苷,对于人参蛋白尤其是SOD的研究相对较少[6~9]。本实验通过比较不同产地人参芦头、主根和须根SOD活力,为 科学 评价人参不同部位质量提供科学依据。    1 材料与仪器   人参分别购自吉林省靖宇县、长白县、抚松县、临江市和安国县等5个地区,经长春中医药大学研发中心姜大成教授鉴定,均为五加科植物人参Panax ginseng C. A. Meyer.,生长年限均为5年。   高速离心机Minispin,德国Eppendorf公司;CP225D型 电子 天平(十万分之一), 北京赛多利斯仪器系统有限公司;LL3000 型冷冻干燥机,德国Heto公司;UV mini-1240型紫外可见分光光度计,日本Shimadzu公司;Multiskan MK3型酶标仪,美国Thermo公司。Bradford蛋白质定量试剂盒,北京Tiangen公司;Tris(三羟甲基氨基乙烷),美国Sigma公司;其他试剂均为国产分析纯。    2 方法与结果   2.1 样品的制备取5年生不同产地人参各若干根,切取芦头、主根及须根,分别磨粉。精密称取各参粉末2 g,加入10 mmol/L Tris-HCl(pH 7.4)缓冲液10 ml ,4℃浸提24 h,10 000 r/min离心10 min,上清液用0.45 μm滤膜过滤,收集滤液,得5批不同来源的样品共15个。各样品留取0.5 ml待测定SOD活力,其余液体冷冻干燥,待测蛋白浓度。   2.2 蛋白含量测定   2.2.1 绘制标准曲线采用Bradford蛋白试剂盒法,将0,10,20,30,40,50

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