伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立.docVIP

　　伴高血压2型糖尿病大鼠模型的建立 作者：孙兆峰 王利 张玲 李大伟 夏作理 【摘要】 目的 制备与人类发病过程类似的伴高血压2型糖尿病大鼠模型。方法 选择40只SPF级雄性g/kg）腹腔注射麻醉。大鼠仰位固定于大鼠手术台上，保持体温在37.5℃左右，用0.03 mm硅化胶管进行双侧颈静脉和左侧颈动脉插管，管腔中预先注入 200 IU/ml 的肝素生理盐水抗凝。双侧静脉导管分别连接微量注射泵的两个针筒座上，用以分别输注葡萄糖和胰岛素，左颈动脉导管用以取血测血糖。待输注装置安装完毕后，首先经左颈动脉导管取血0.5 ml用于基础血糖值和基础血浆胰岛素测定，从右外颈静脉插管按1 ml/kg体重注射入1 000 IU/ml肝素生理盐水溶液使血液抗凝，然后封住插管的出口，以免静脉血流出。然后从右颈静脉恒速输注胰岛素，速率为4 mU·kg-1·min-1，当血糖值从基础值下降达到0.5 mmol/L时，开始从左颈静脉输注 10%葡萄糖溶液，每5 min测一次血糖，根据所测血糖值不断调整葡萄糖输注速率(GIR)，连续30 min血糖值稳定在基础血糖值±0.5 mmol/L范围内，称之为“钳夹形成”，记录稳态下连续60 min的GIR。取稳态下6次GIR的平均值。 　　1.3.4 尾动脉血压测定 使用ALCNIBP无创血压测定分析系统，预热仪器，把大鼠用固定盒固定，露出尾巴安装并调整好压力感受器，放入恒温箱中30 min，待大鼠安静且脉搏波形稳定后开始测量，每只记录6次，去掉最高和最低值，取其平均作为此次的血压值。 　　1.3.5 生化及一般指标检测 每周测1次食量、饮水量和体重。每4周同一时间点剪尾尖取血测血糖，采用葡萄糖氧化酶法，以血糖≥13 mmol/L诊断为糖尿病。正糖钳实验同时颈动脉取血0.5 ml，肝素抗凝，4℃恒温3 000 r/min离心，取血浆采用放免法测空腹血浆胰岛素(FINS)。 　　1.4 统计学分析 使用SAS8.1 软件进行数据处理，实验数据以x±s表示，组间差异采用t检验。 　　 2 结果 　　2.1 两组大鼠食量、饮水量和体重变化情况 与对照组大鼠比较，实验前8 . 　　表1 两组大鼠食量、饮水量以及体重的变化（略） 　　与对照组比较：1）P＜0.05，2）P＜0.01，下表同 　　2.2 两组大鼠尾动脉血压、FINS和GIR的比较 饲喂高脂高盐饲料16 l，再取血1滴???血糖，可准确反映体内真实血糖值。实验中还观察到实验组的FINS值明显高于对照组，这说明高脂高盐饮食已引起IR，胰岛素代偿性增加。 　　高脂高盐饲料喂养大鼠16 proves exercisestimulated but not insulinstimulated muscle glucose uptake in highfatfed C57BL/6J mice〔J〕.Diabetes，2004;53（2）:30614. 　　7 卜 石，杨文英,王 昕，等.长期高脂饲料饲养对大鼠葡萄糖刺激的胰岛素分泌的影响〔J〕.中华内分泌代谢杂志，2003；19(1):258. 　　8 Bloomgarden ZT.American Diabetes Association annual meeting，insulin resistance，exercise and obesity〔J〕.Diabetes Care，1999；22(3):51722. 　　9 So J Physiol，2004；286(5):1597602. 　　10 Fukuda N，Satoh C，Hu ooth muscle cells from spontaneously hypertensive rats 〔J〕.J Hypertens,2001;19(9):16518.