脑肿瘤干细胞体外分化的形态、标志物及细胞增殖动力学特征.pdf

·1604· ．颅内肿瘤研究． 脑肿瘤干细胞体外分化的形态、 标志物及细胞增殖动力学特征 季晓燕黄强 董军 朱玉德王爱东 兰青 【摘要】 目的 探讨脑肿瘤干细胞(BTSc)在体外分化过程中的细胞形态、分化相关标志物表 达和增殖动力学变化，为进一步研究B鸭c分化走向提供实验依据。方法取同一病例初发和复发 的间变性室管膜瘤患者的肿瘤手术标本，用cDl33免疫磁珠分离出cDl33+细胞，加血清分化，相差 显微镜下观察其形态，在未分化和分化后第3、7、lO、2l天收集细胞，流式细胞术检测细胞cDl33+、神 经上皮干细胞蛋白(Nestin)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、B一微管蛋白(Tubulinp-)Ⅲ的表达。在未分 化和分化第7天做增殖周期测定。取正常神经干细胞(Nsc)作为对照。结果(1)形态：B鸭c由圆 形到短梭形和多角形、再到长梭形及少量星形，第7天以后细胞形态往短梭形和圆形回复，出现细胞 聚集成球重新飘浮在培养基中；Nsc按固有规律分化。(2)标志物：B髑c和Nsc未分化时cDl33+和 Nestin均高表达，B鸭c分化后cDl33+和Nestin全程表达，且先降后升，第7天表达率分别为(3．65± (11．94土0．36)％。(3)增殖周期及倍体：BTsc分化前为亚二倍体，分化后有少量二倍体和大量亚二 倍体及超二倍体，处于G2-M期和s期的细胞比例大于Nsc，复发B，I．Sc分化后细胞组成比原发B鸭c 复杂；神经干细胞分化前后都为整二倍体，主要处于G0-G1期。结论细胞形态、标志物的表达、增 殖周期及倍体变化反映出脑肿瘤干细胞分化走向和神经干细胞不同，前者存在明显的分化障碍。 【关键词】干细胞；脑肿瘤；抗原，分化；细胞周期 Ch盯躯teris廿嚣of morpholo留，衄b弛n廿a6叫reIatedmarke瑙，andpm瞰braⅡ蚰dynalIli璐of in、ritm diffe咖廿atedbraint咖∞rst哪ceⅡs 月瓜∞一妒n，日似ⅣG9缸，zg，D0ⅣG胁，删砘一如， 吼ⅣGAi一幽昭，“ⅣQi愕脚口疗砌m矿Ⅳeu瑚嘴可口以Bmin几啪r触e口砌如6D删D砂，SecD砌 A历f妇ed舶s础耐D厂舶。砘删‰讹船泖，S扎勘M2J5D凹，现i阮 To tlle ofdif玷rentiation 【Abstr躯t】obj∞6vepursuechanges“cell肿rphology，expres8ion related ofbmintllmorstem di妇feremiationin“tm． markers。andprolifer“oncycles cells(BTSCs)after MemodsTumorstemcellsoftllelineCDl33+wereobtainedhom椭msDecimens矗omoneclinicalc酗e 们th obtained first opemtion，onebeing during山eopemtion趴d aII印1asiaependymoc”omaduring specimen tllensecondspecimenbeingobtainedduring山esecondoperation6monthslateron吐lerecun-enttumor． to inmedium CDl33+cellswereacquiredbyusingmagn甜csoItingandtll即cultureddi饪brentiate 10％fetalbovinesemm．The t11ecellsw踮observedunder con讹st containing morpholo胛of pha8e CellswerecoⅡ