系列ι-卡拉胶寡糖制备及其电喷雾串联质谱序列分析.pdfVIP

V01．3l 高等学校化学学报 No．2 OFCHINESEUNIVERSITIES 303—308 2010年2月 CHEMICALJOURNAL 系列‘．卡拉胶寡糖制备及其电喷雾 串联质谱序列分析 杨 波，于广利，郝 翠，赵峡，嵇国利，胡艳南，王玉峰 (中国海洋大学医药学院糖科学与糖工程实验室，青岛266003) 摘要以。-卡拉胶为原料，在稀酸条件下进行酸水解得到其寡糖混合物，采用低压凝胶渗透色谱(LPGPC) 进行分离纯化，获得了10个寡糖单体．在利用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)和高效薄层层析(HFIZC)对其 纯度进行分析的基础上，通过红外光谱(IR)、核磁共振波谱(NMR)和电喷雾离子化质谱(ESI．MS)对其结构 进行表征，并用电喷雾碰撞诱导串联质谱(ESI．CID．MS／MS)对其序列进行分析．结果表明，它们分别是还原 端为2一硫酸-3，6-内醚半乳糖(A2S)和非还原端为4．硫酸．半乳糖(C,4S)的‘．卡拉胶二至二十糖．这些酸法水 解制备的寡糖结构新颖，不同于‘-卡拉胶酶法制备的新‘一卡拉胶寡糖．这不仅丰富了海洋寡糖库数据，也为 进一步运用糖生物芯片技术探索其与蛋白之间的相互作用提供了物质基础． 关键词。-卡拉胶寡糖；分离纯化；电喷雾串联质谱；序列分析 中图分类号0629．1 文献标识码A 文章编号0251-0790(2010)0243303-06 醚一a-D-半乳糖(A2S)交替连接而成的线性高分子聚合物…．作为一种水溶性天然硫酸多糖，卡拉胶已 被广泛应用于食品、医药和化工等领域幢J．近年来，卡拉胶寡糖及其衍生物的许多重要生物学功能和 生理活性逐渐被人们所认识，并在抗肿瘤、抗凝血、抗病毒、抗溃疡、抗氧化及免疫调节等方面都显示 出良好的应用及开发前景p曲J． 目前，有关‘-卡拉胶寡糖的制备方法主要采用t．卡拉胶酶法，该法是通过水解卡拉胶分子中的 卢一l，4糖苷键制备寡糖，所得寡糖分子的非还原端为2-硫酸．3，6一内醚半乳糖(A2s。。)，还原端为4一硫 酸-半乳糖(G4S。)，称为新十卡拉胶寡糖oh引．为了深入开展不同结构类型卡拉胶寡糖的结构与活性 关系的研究，采用不同方法制备结构多样的硫酸寡糖，有利于从分子水平上研究并阐明硫酸寡糖及其 衍生物与人类疾病发生、发展的关系及其作用机理，从而指导海洋寡糖类新药的研究与开发，因此， 系列。一卡拉胶寡糖单体的制备具有重要意义．本文采用稀酸降解方法，通过柱层析分离技术获得了10 个。一卡拉胶寡糖单体，并用串联质谱方法对其序列进行分析． 1实验部分 1．1试剂与仪器 ‘．．卡拉胶(Type 1．6cm×60 Biotech Superdex30 G10凝胶层析色谱柱(XK cm，瑞典Pharmacia prepgrade以及Sephadex 公司)；Dowex cm×20 Gel60 MerckDarmstadt公司)；Micromass cm，德国Silica Q—Tof质谱仪(英国WatersManchester公司)； 收稿日期：2009-03．10． 自然科学基金(批准号资助． 联系人简介：于广利，男，博士，教授，博士生导师，主要从事糖化学和糖生物学研究．E-mail：gl”@OUC．e1．．cn 万方数据万方数据 高等学校化学学报 V01．31 )IKTA—FPLC液相色谱仪(瑞典Pharmacia 1．2寡糖的制备及其纯度分析