2.2.2动物细胞的融合与单克隆抗体(上课).ppt

1.怎样获得能够产生抗体的B淋巴细胞？ 2.骨髓瘤细胞具有什么特性？ 3.科学家期望杂交瘤细胞有怎样的性状？ 4.细胞融合有哪几种情况发生？怎样筛选出杂交瘤细胞？ 5.杂交瘤细胞在体外培养要用到那种细胞工程技术？ 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 脱分化 再分化 愈伤组织 杂种植株 温故知新: 植物体细胞杂交过程 植物细胞A 植物细胞B 去掉细胞壁 去掉细胞壁 原生质体A 原生质体B 原生质体融合 杂合的原生质体 再生出细胞壁 杂种细胞 细胞分裂 分化发育 愈伤组织 杂种植株 1、动物细胞融合的概念是什么？ 2、动植物细胞在结构上有何区别？这对它们杂交或融合过程有什么影响？ 3、植物体细胞杂交诱导原生质体融合常用的方法有哪些？那动物细胞融合呢？ 4、动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理是否相同？是什么原理？ 5、动物细胞融合有什么意义？主要应用在哪些方面？ 6、植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能象电影上一样形成杂种动物个体吗?为什么？ 动物细胞A 动物细胞B 诱导、融合 杂合的细胞 有丝分裂 2个完整的杂交细胞AB 一、动物细胞融合 1.细胞融合： 是指两个或两个以上的细胞融合为一个细胞的过程。 ⑴自然发生： 受精卵 鼠细胞 人细胞 人工诱导 动物细胞融合 杂交细胞 ⑵人工诱导： 利用诱导剂诱导动物细胞融合 诱导因素：聚乙二醇、灭活的病毒或电激等。 仙台病毒 紫外线 灭活 丧失感染活性（不感染细胞） 保留融合活性（诱导细胞融合） ①什么是病毒的灭活？ 灭活是指用物理或化学手段使病毒失去感染能力，但是并不破坏病毒的抗原结构。 ②灭活病毒诱导细胞融合的原理 病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使细胞互相凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面 细胞膜被病毒颗粒穿通 细胞膜连接 细胞融合，形成杂交细胞 （细胞膜具有一定的流动性） 物理法的融合效率较高,且对细胞（原生质体）的伤害小,易操作、控制和观察。 太空中处于失重状态，不同种细胞（原生质体）更容易亲近； 为什么在太空中细胞（原生质体）融合率会大大上升？为什么选用物理法诱导？ 正在融合的 淋巴细胞与骨髓瘤细胞 正在融合的鸡血细胞 ⑶动物细胞融合的原理： 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 灭活病毒、PEG、电激等 融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞 诱导的手段: 融合后细胞的类型: AB杂种细胞遗传物质 有什么特点？ 三种AA、AB、BB（A、B） 含两种生物的遗传物质 动物细胞融合过程 原理: 2、动物细胞融合的应用 1.突破有性杂交方法的局限,使远缘杂交成为可能。 2.成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段。 鼠—鸡、鼠—兔、鼠—猴、人—鼠、人—兔、 人—鸡、人—蛙、酵母菌—鸡 、人—胡萝卜等 3、重要用途：制备单克隆抗体。 获得杂种植株 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 　　 物理（离心、振 荡、电激） 化学（聚乙二醇） 直接诱 导细胞融合 去壁—原生质体 融合—诱导新壁 —杂种植株 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性 结果　 诱导方法 步骤　 融合的原理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 植物、动物细胞融合的比较 获得杂交细胞 小结1 【例1】能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 （ ） A.离心 B.灭活的病毒 C.电刺激 D.振动 【例2】融合后的杂交细胞的遗传物质有何特点（ ） 具有原来两个或多个细胞的遗传信息 B.能无限增殖 C.可形成新个体 D.培养过程会贴壁 【例3】动物细胞融合的作用中最重要的是（ ） A.克服远源杂交不亲和 B.制备单克隆抗体 C.培育新物种 D.生产杂种细胞 B B A 使用相应的抗体检测乙肝病毒——抗原 二、单克隆抗体的制备 医院一般怎样检测人体内是否存在乙肝病毒？ 乙肝病毒模式图 凡能够引起机体产生特异性 免疫应答的物质叫做抗原。 1、什么是抗原？ 例如花粉、病菌、病毒等。有时自身的组织或细胞也会成为抗原，如癌细胞等。 抗原决定簇： 抗原表面具有的某些特定的化学基团，能决定抗原特异性，是免疫细胞识别抗原的重要依据。 抗原通常是由多个抗原决定簇组成的 2、什么是抗体？由何种细胞产生？主要分布在哪里?起何作用？