参归软肝胶囊对脾虚小鼠免疫功能的影响.docVIP

　　参归软肝胶囊对脾虚小鼠免疫功能的影响 作者：李艳 路西明 王淑英 王建刚 【摘要】 　　目的观察参归软肝胶囊（SGR）对脾虚小鼠免疫功能的影响。方法通过腹腔巨噬细胞吞噬实验及淋巴细胞转化实验［使用脾虚型小鼠以刀豆素(ConA)或脂多糖(LPS)作诱导剂，通过体内给药，体外实验的方法］测定SGR对脾虚小鼠非特异性的吞噬细胞功能及特异性的细胞免疫、体液免疫功能的影响。结果给脾虚小鼠灌服受试药，能明显提高其腹腔巨噬细胞的吞噬能力和T、B淋巴细胞增殖反应 (P＜0.05)。结论参归软肝胶囊能提高脾虚小鼠巨噬细胞吞噬能力、细胞免疫及体液免疫的功能。 【关键词】 参归软肝胶囊； 脾虚小鼠； 免疫功能 　　AbstractObjectiveTo study the effects of SGR capsule on immunity function of spleen-deficient mice.MethodsThe spleen-deficient mice model inal phagocyte and the transform test of lymphocytes ultiplication rate of T,B lymphocytes in vitro.ResultsAfter fed edicine, the engulfing of abdominal phagocytic cells and the multiplication rate of T,B lymphocytes arkedly(P＜0.05).ConclusionSGR capsule can improve the functions of nonspecific immunity,cellular immunity and humoral immunity of the spleen-deficient mice. 　　Key mune function 　　参归软肝胶囊主要由丹参、当归、黄芪、川芎、白芍、郁金组成，有益气、活血养血、疏肝解郁功能。本实验通过腹腔巨噬细胞吞噬功能及淋巴细胞转化实验，观察参归软肝胶囊对脾虚小鼠非特异性的吞噬细胞功能及特异性的细胞免疫、体液免疫功能的影响，为该药的临床应用提供实验依据。 　　1 材料 　　1.1 动物 昆明小鼠，河南省实验动物中心提供，医动0002631。 　　1.2 药物大黄煎剂及参归软肝胶囊均由河南科技大学第一附属 医院 制剂室提供；ConA为美国Sigma公司产品；LPS为美国Sigma公司产品；MTT瑞士试剂公司产品；RPMI1640培养基，日本产品；小牛血清，天津生化制品厂生产，批号060312。 　　1.3 检测仪器 OD-3022酶标仪，国营华乐 电子 管厂制；CO2培养箱，日本产；721分光光度计，上海第三分析仪器厂生产。 　　2 方法 　　2.1 分组小鼠60只，体重20～22 g，雌雄各半，随机分为6组，每组10只，0.2 ml/10 g·d-1×14,ig。正常对照组0.5% CMC-Na；用大黄煎剂造模为脾虚小鼠，造模小鼠分为模型组，复方鳖甲软肝片组，SGR低、中、高剂量组。模型组0.5%CMC-Na；复方鳖甲软肝片对照组2.7 g·kg-1；SGR低、中、高3剂量组分别为（生药·kg-1）2.5，5.0，7.5 g。 　　2.2 方法除正常对照组外，其余各组动物均按上述剂量每日灌服大黄煎剂（40 g生药·kg-1），连续10 d，给药组动物于第7 天起按拟定剂量灌服相应受试药，连续14 d。 　　2.2.1 SGR对腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响［1，2］将小鼠处死，仰卧固定于工作台上，腹部碘伏局部消毒后，注入2 ml的1640培养液冲涮腹腔后，吸出腹腔液，滴0.1 ml液体于干净玻片上，滴加致敏酵母液（按腹腔细胞∶酵母颗粒=1∶10比例），4℃，湿盒内过夜，用1640培养液轻轻冲洗，0.25%戊二醛固定，40倍光学显微镜下，随机计数200个腹腔巨噬细胞（贴壁细胞）中吞噬或吸附3个酵母以上的巨噬细胞数量。 　　2.2.2 SGR对ConA，LPS诱导脾虚小鼠T、B淋巴细胞增殖反应的影响［1，2］在超净工作台中取小鼠脾脏, 制成脾细胞悬液(2×106·ml-1)， 在96 孔板上每孔加100 μl细胞悬液, 分别加入ConA( 10 mg·ml-1) 和LPS (20 mg·ml-1)100 μl。每个样品设3个重复孔。置37℃，5% CO2培养箱中培养66 h。弃上清, 每孔加入20 μl的 M TT，37℃孵育4 h, 再加入DMSO振荡。采用酶标仪测OD值，λ= 570 nm。 　　细胞增殖反应率（%）=（实验孔平均OD值/对照孔平均OD值）